කේන්ද්රාපසාරී බෙදුම්කරු සහ ඖෂධ යන්ත්රෝපකරණ නිෂ්පාදකයාගේ වෘත්තීය නිෂ්පාදනය - Zonelink
කේන්ද්රාපසාරී එකක් ප්රෝටීන වලින් dna වෙන් කරයිද?
කේන්ද්රාපසාරී යන්ත්රයක් DNA අණුවක් ප්රෝටීන වලින් වෙන් කරයිද?
හැඳින්වීම
කේන්ද්රාපසාරීකරණය යනු විද්යාත්මක පර්යේෂණ සහ සායනික රසායනාගාරවල ඒවායේ ඝනත්වය මත පදනම්ව සාම්පලයක විවිධ සංරචක වෙන් කිරීම සඳහා බහුලව භාවිතා වන වැදගත් තාක්ෂණයකි. මෙම තාක්ෂණයේ එක් පොදු යෙදුමක් වන්නේ දී ඇති ජීව විද්යාත්මක සාම්පලයකින් DNA සහ ප්රෝටීන හුදකලා කිරීමයි. මෙම ලිපියෙන්, කේන්ද්රාපසාරී යන්ත්රයකට ප්රෝටීන වලින් DNA ඵලදායී ලෙස වෙන් කිරීමට හැකියාව තිබේද යන්න ගවේෂණය කර කාර්යක්ෂම වෙන්වීමක් ලබා ගැනීම සඳහා භාවිතා කරන විවිධ ක්රමවේදයන් පිළිබඳව සොයා බලමු.
කේන්ද්රාපසාරීකරණය අවබෝධ කර ගැනීම
කේන්ද්රාපසාරී යන්ත්රයක් භාවිතයෙන් ප්රෝටීන වලින් DNA වෙන් කිරීමේ විශේෂතා සොයා බැලීමට පෙර, කේන්ද්රාපසාරී යන්ත්රයේ මූලික මූලධර්ම තේරුම් ගැනීම වැදගත් වේ. කේන්ද්රාපසාරී යන්ත්රයක් අවසාදිත මූලධර්මය මත ක්රියාත්මක වන අතර ශක්තිමත් කේන්ද්රාපසාරී බලයක් නිර්මාණය කිරීම සඳහා අධිවේගී භ්රමණය භාවිතා කරයි. මෙම බලයෙන් සාම්පලයක අංශු ඒවායේ ඝනත්වය මත පදනම්ව වෙන් කිරීමට හේතු වන අතර, ඝන අංශු සාම්පල නලයේ පතුල දෙසට සංක්රමණය වේ. එහි ප්රතිඵලයක් ලෙස, සැහැල්ලු අංශු ඉහළින්ම රැඳී සිටීමට නැඹුරු වේ.
DNA සහ ප්රෝටීන වෙන් කිරීමේ අභියෝගය
DNA සහ ප්රෝටීන වෙන් කිරීම සම්බන්ධයෙන් ගත් කල, අණු දෙකටම සමාන අණුක බරක් ඇති බැවින් එය අභියෝගයක් මතු කරයි. ඵලදායී වෙන් කිරීමේ තාක්ෂණයක් නොමැතිව, පිරිසිදු DNA හෝ ප්රෝටීන් සාම්පල ලබා ගැනීම දුෂ්කර ය. කෙසේ වෙතත්, කේන්ද්රාපසාරීකරණය වෙන් කිරීමේ ක්රියාවලියට සහාය විය හැකි නමුත්, එය තනිවම ප්රමාණවත් නොවිය හැකිය.
1. අවකල කේන්ද්රාපසාරීකරණය: මූලික වෙන්වීම
2. අල්ට්රාසෙන්ට්රිෆියුගේෂන්: වැඩිදියුණු කළ වෙන් කිරීම
3. ඝනත්ව අනුක්රමික කේන්ද්රාපසාරීකරණය: ක්රියාවලිය පිරිපහදු කිරීම
4. බෆර් තේරීමේ වැදගත්කම
5. කේන්ද්රාපසාරීකරණය එදිරිව අනෙකුත් වෙන් කිරීමේ ශිල්පීය ක්රම
අවකල කේන්ද්රාපසාරීකරණය: මූලික වෙන් කිරීම
ප්රෝටීන වලින් DNA වෙන් කිරීමේ පළමු පියවර වන්නේ අවකල කේන්ද්රාපසාරීකරණයයි. මෙම ක්රමය සෛලීය සංරචක පුළුල් ලෙස වෙන් කිරීම සඳහා විවිධ කේන්ද්රාපසාරීකරණ වේගයන් භාවිතා කරයි. මෙම ක්රියා පටිපාටිය අතරතුර, සමජාතීය සෛල හෝ පටක සාම්පල අඩු වේග කේන්ද්රාපසාරීකරණයට භාජනය වේ, සාමාන්යයෙන් මිනිත්තුවකට 1000-5000 ක පමණ විප්ලව (rpm). මෙම අඩු වේග භ්රමණය න්යෂ්ටීන් සහ නොවෙනස්ව සෛල වෙන් කිරීමට හැකියාව ලබා දෙන අතර එමඟින් අමු භාගීකරණයකට මග පාදයි. කෙසේ වෙතත්, එය DNA සහ ප්රෝටීන සම්පූර්ණයෙන් වෙන් කිරීමක් ලබා නොදේ.
අති කේන්ද්රාපසාරීකරණය: වැඩිදියුණු කළ වෙන් කිරීම
අවකල කේන්ද්රාපසාරීකරණයේ සීමාවන් ජය ගැනීම සඳහා, අල්ට්රා කේන්ද්රාපසාරීකරණය දර්ශනයට පැමිණේ. අල්ට්රා කේන්ද්රාපසාරීකරණය යනු 100,000 rpm දක්වා වේගයකට ළඟා විය හැකි අධිවේගී කේන්ද්රාපසාරීකාරක වේ. ආරම්භක අඩු වේග කේන්ද්රාපසාරීකරණයෙන් ලබාගත් අමු කොටස අල්ට්රා කේන්ද්රාපසාරීකරණයට ලක් කිරීමෙන්, DNA සහ ප්රෝටීන අතර ඉහළ මට්ටමේ වෙන්වීමක් ලබා ගත හැකිය. බර DNA අණු නලයේ පතුලට අවසාදිත වී දෘශ්යමාන පෙත්තක් සාදයි, ප්රෝටීන සුපිරි ද්රව්යයේ පවතී.
ඝනත්ව අනුක්රමික කේන්ද්රාපසාරීකරණය: ක්රියාවලිය පිරිපහදු කිරීම
DNA සහ ප්රෝටීන වෙන් කිරීම තවදුරටත් පිරිපහදු කිරීම සඳහා, ඝනත්ව අනුක්රමික කේන්ද්රාපසාරීකරණය භාවිතා කරයි. මෙම තාක්ෂණයේදී, සුක්රෝස් හෝ සීසියම් ක්ලෝරයිඩ් වැනි ඝනත්ව අනුක්රමික මාධ්යයක් සකස් කර ඇත. මෙම මාධ්යය කේන්ද්රාපසාරී නලයේ ඉහළ සිට පහළට වැඩි වන ඝනත්ව පරාසයකින් සමන්විත වේ. පෙර පියවරෙන් ලබාගත් අමු කොටස ඝනත්ව අනුක්රමණය මත ප්රවේශමෙන් ස්ථර කර නැවත වරක් අතිශය කේන්ද්රාපසාරීකරණයට භාජනය වේ. DNA සහ ප්රෝටීන ඒවායේ ඝනත්වය මත පදනම්ව වෙන් වී අනුක්රමණය තුළ වෙනස් පටි සාදයි. අනුක්රමණයේ ඛණ්ඩනය පිරිසිදු DNA සහ ප්රෝටීන් සාම්පල නැවත ලබා ගැනීමට ඉඩ සලසයි.
බෆර් තේරීමේ වැදගත්කම
කේන්ද්රාපසාරීකරණයේදී භාවිතා කරන බෆරය කාර්යක්ෂම වෙන්වීමක් ලබා ගැනීම සඳහා තීරණාත්මක කාර්යභාරයක් ඉටු කරයි. එය වෙන් කරනු ලබන අණු වල ස්ථායිතාව සහ අඛණ්ඩතාවයට බලපායි. DNA සඳහා, DNA ස්ථායිතාව පවත්වා ගැනීමට ඇති හැකියාව නිසා pH අගය 8.0 ක් සහිත Tris-EDTA බෆරයක් බහුලව භාවිතා වේ. අනෙක් අතට, ප්රෝටීන වලට නිශ්චිත pH මට්ටම් සහිත බෆර අවශ්ය වේ, සාමාන්යයෙන් 7.0 ක් පමණ, denaturation වැළැක්වීමට සහ ඒවායේ ස්වදේශීය ව්යුහය පවත්වා ගැනීමට. සුදුසු බෆරය තෝරා ගැනීමෙන් DNA සහ ප්රෝටීන වල ගුණාත්මක භාවයට හානි නොකර නිසි ලෙස වෙන් කිරීම සහතික කෙරේ.
කේන්ද්රාපසාරීකරණය සහ අනෙකුත් වෙන් කිරීමේ ශිල්පීය ක්රම
ප්රෝටීන වලින් DNA වෙන් කිරීමේදී කේන්ද්රාපසාරීකරණය බහුලව භාවිතා වන තාක්ෂණයක් වුවද, එය භාවිතා කරන එකම ක්රමය නොවිය හැකි බව පිළිගැනීම වැදගත්ය. වර්ණදේහ විද්යාව, විද්යුත් විච්ඡේදනය සහ වර්ෂාපතනය වැනි අනෙකුත් ශිල්පීය ක්රම මගින් වඩාත් පිරිපහදු කළ වෙන්වීමක් ලබා ගැනීම සඳහා කේන්ද්රාපසාරීකරණයට අනුපූරක විය හැකිය. සෑම තාක්ෂණයකටම තමන්ගේම වාසි සහ සීමාවන් ඇති අතර, පර්යේෂකයන් බොහෝ විට DNA සහ ප්රෝටීන වල අපේක්ෂිත සංශුද්ධතාවය සහ ප්රතිසාධනය ලබා ගැනීම සඳහා බහු ක්රම ඒකාබද්ධ කරයි.
නිගමනය
නිගමනයක් ලෙස, ප්රෝටීන වලින් DNA වෙන් කිරීම සඳහා කේන්ද්රාපසාරී ඇත්ත වශයෙන්ම ප්රයෝජනවත් වුවද, එය අනෙකුත් ශිල්පීය ක්රම සමඟ ඒකාබද්ධව වඩාත් හොඳින් ක්රියා කරයි. අවකල කේන්ද්රාපසාරීකරණය, අතිශය කේන්ද්රාපසාරීකරණය සහ ඝනත්ව අනුක්රමික කේන්ද්රාපසාරීකරණය පිරිසිදු සාම්පල ලබා ගැනීමට උපකාරී වන වෙන් කිරීමේ පියවර මාලාවක් සාදයි. අතිරේකව, සුදුසු බෆර තෝරා ගැනීම සහ අනෙකුත් වෙන් කිරීමේ ශිල්පීය ක්රම සලකා බැලීම DNA-ප්රෝටීන් වෙන් කිරීමේ සමස්ත කාර්යක්ෂමතාව තවදුරටත් වැඩි දියුණු කරයි.
.