Хлоропласт ба митохондриаг центрифугээр хэрхэн ялгах вэ

Центрифуг: Хлоропласт ба митохондрийг ялгах хүчирхэг арга

Оршил:

Центрифуг нь молекул биологи болон биохимийн салбарт өргөн хэрэглэгддэг арга бөгөөд хэмжээ, хэлбэр, нягтралаас нь хамааран эсийн янз бүрийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг ялгах боломжийг олгодог. Энэхүү нийтлэлд энерги үйлдвэрлэх болон бусад чухал эсийн үйл явцад оролцдог эукариот эсүүдэд байдаг хоёр амин чухал эрхтэн болох хлоропласт ба митохондриаг ялгахад центрифугийн хэрэглээг нарийвчлан авч үзэх болно.

Эсийн үйл явцад хлоропласт ба митохондрийн үүрэг

Ургамлын эсэд байдаг хлоропластууд нь гэрлийн энергийг глюкоз хэлбэрээр хадгалагддаг химийн энерги болгон хувиргадаг фотосинтезийн үйл явцыг хариуцдаг. Энэхүү чухал үйл явц нь хүчилтөрөгчийн үйлдвэрлэлийг хөнгөвчилж, Дэлхий дээрх амьдралын оршин тогтноход чухал үүрэг гүйцэтгэдэг. Ургамал болон амьтны эсэд байдаг митохондрийг эсийн эрчим хүчний эх үүсвэр гэж нэрлэдэг. Тэд эсийн амьсгалыг хариуцдаг бөгөөд глюкозыг аденозин трифосфат (ATP) хэлбэрээр эсийн ашиглах боломжтой энерги болгон хувиргадаг.

Хлоропласт ба митохондрийг ялгах хэрэгцээ

Хлоропласт ба митохондрийн бие даасан үүрэг, шинж чанарыг ойлгох нь эсийн үйл явцын талаар ойлголттой болох, янз бүрийн өвчнийг эмчлэх боломжит аргуудыг боловсруулахыг зорьж буй судлаачдын хувьд чухал юм. Эдгээр органеллуудыг эсийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн нарийн төвөгтэй холимогоос ялгаж салгах нь цаашдын шинжилгээ, туршилтад зориулж цэвэр дээж авахад чухал ач холбогдолтой юм. Энэхүү салгах ажлыг центрифугээр хийх замаар хийх боломжтой.

Центрифугийн үндэс

Центрифуг нь дээж доторх бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг салгахад төвөөс зугтах хүчийг ашиглахыг хэлнэ. Дээжийг өндөр хурдтайгаар эргэлддэг ротортой машин болох центрифугт байрлуулна. Эргэлтийн үед төвөөс зугтах хүч нь нягт бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг ёроолд тунадасжуулж, үрэл үүсгэдэг бол нягтрал багатай бүрэлдэхүүн хэсгүүд нь дээд давхаргад үлддэг. Центрифугийн хурд ба үргэлжлэх хугацаа, түүнчлэн центрифугийн хоолойн сонголт нь тодорхой хэрэглээ болон дээжийн найрлагаас хамааран өөр өөр байдаг.

Органеллийг ялгах дифференциал центрифугжилт

Органеллийг ялгахад хамгийн түгээмэл хэрэглэгддэг центрифугийн арга бол дифференциал центрифуг юм. Энэ арга нь дээжийг хурд болон үргэлжлэх хугацааг нэмэгдүүлэн цуврал дифференциал центрифугт хамруулж фракцлах зарчимд суурилдаг. Центрифугийн параметрүүдийг тохируулснаар судлаачид хлоропласт ба митохондриаг эсийн бусад бүрэлдэхүүн хэсгээс үр дүнтэйгээр ялгаж чадна.

Хлоропласт ба митохондрийг ялгах алхам алхмаар гарын авлага

Алхам 1: Нэгэн төрлийн болгох

Дифференциал центрифугийн эхний алхам бол дээжийг нэгэн төрлийн болгох явдал юм. Энэ үйл явц нь эсийг зөөлөн задалж, тэдгээрийн агуулгыг гаргаж, эрхтэнүүдэд нэвтрэх боломжийг олгодог. Эсийг тасалдуулахын тулд механик тасалдуулалт болон шингэн азотын боловсруулалт зэрэг хэд хэдэн аргыг ашиглаж болно.

Алхам 2: Дифференциал центрифугжилт

Гомогенжүүлэлтийн дараа дээжийг хэд хэдэн дифференциал центрифугт оруулна. Анхны бага хурдтай центрифугээр (1000-2000 xg) том эсийн хог хаягдал болон эвдэрээгүй эсүүдийг зайлуулж, түүхий митохондри ба хлоропластын фракц үлдээнэ. Энэ фракцыг дараа нь илүү өндөр хурдтай центрифугээр (10,000-15,000 xg) оруулж, хлоропластууд митохондриас салдаг.

Алхам 3: Цэвэр ариун байдлыг сайжруулах

Олж авсан хлоропласт ба митохондрийн фракцуудыг цаашид цэвэршүүлэхийн тулд нэмэлт центрифугийн алхмуудыг хийж болно. Үүнд центрифугийн дараа гаргаж авсан үрлэн материалыг тохиромжтой буферт дахин дүүргэж, процессыг хурд болон үргэлжлэх хугацаагаар давтах орно. Эдгээр нэмэлт центрифуг нь үлдсэн бохирдлыг арилгахад туслах бөгөөд эцсийн органеллийн фракцуудын цэвэр байдлыг нэмэгдүүлэх болно.

Дүгнэлт:

Центрифугжилт нь эсийн биологийн салбарт хувьсгал хийсэн олон талт арга бөгөөд эсийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг салгахад зайлшгүй шаардлагатай хэрэгсэл болсон юм. Дифференциал центрифугийг ашигласнаар судлаачид хлоропласт ба митохондриаг амжилттай салгаж, цаашдын шинжилгээ, туршилт хийхэд үнэ цэнэтэй цэвэршүүлсэн дээжийг гаргаж чадна. Эдгээр органеллуудыг ялгах чадвар нь тэдгээрийн тодорхой үүрэг, механизмыг судлах боломжийг нээж, эсийн үйл явцыг илүү сайн ойлгоход хувь нэмэр оруулж, олон төрлийн шинжлэх ухааны салбарын дэвшлийг дэмжихэд хувь нэмэр оруулдаг.