ဗဟိုခွာစက်ဖြင့် ကလိုရိုပလတ်စ်နှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားကို မည်သို့ခွဲထုတ်ရမည်နည်း

ဗဟိုခွာစက်ဖြင့်လည်ပတ်ခြင်း- ကလိုရိုပလတ်စ်နှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီယာကို ခွဲထုတ်ရန် အစွမ်းထက်သောနည်းပညာ

မိတ်ဆက်:

ဗဟိုခွာစနစ်သည် မော်လီကျူးဇီဝဗေဒနှင့် ဇီဝဓာတုဗေဒတွင် ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့်အသုံးပြုသော နည်းစနစ်တစ်ခုဖြစ်ပြီး ၎င်းတို့၏ အရွယ်အစား၊ ပုံသဏ္ဍာန်နှင့် သိပ်သည်းဆအပေါ် အခြေခံ၍ မတူညီသောဆဲလ်အစိတ်အပိုင်းများကို ခွဲထုတ်နိုင်စေပါသည်။ ဤဆောင်းပါးသည် စွမ်းအင်ထုတ်လုပ်မှုနှင့် အခြားအရေးကြီးသောဆဲလ်လုပ်ငန်းစဉ်များတွင် ပါဝင်သော eukaryotic ဆဲလ်များတွင်တွေ့ရှိရသော အရေးကြီးသောအင်္ဂါနှစ်ခုဖြစ်သည့် chloroplasts နှင့် mitochondria တို့ကို ခွဲထုတ်ရန်အတွက် ဗဟိုခွာစနစ်အသုံးချမှုကို လေ့လာသုံးသပ်ထားပါသည်။

ဆဲလ်လုပ်ငန်းစဉ်များတွင် ကလိုရိုပလတ်စ်နှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီယာတို့၏ အခန်းကဏ္ဍ

အပင်ဆဲလ်များတွင်ရှိသော ကလိုရိုပလတ်စ်များသည် အလင်းစွမ်းအင်ကို ဂလူးကို့စ်ပုံစံဖြင့် သိုလှောင်ထားသော ဓာတုစွမ်းအင်အဖြစ်သို့ ပြောင်းလဲပေးသည့် ဖြစ်စဉ်တစ်ခုဖြစ်သည့် ဖိုတိုဆင့်သစစ်အတွက် တာဝန်ရှိပါသည်။ ဤအရေးကြီးသော လုပ်ငန်းစဉ်သည် အောက်ဆီဂျင်ထုတ်လုပ်မှုကို လွယ်ကူချောမွေ့စေပြီး ကမ္ဘာမြေပေါ်တွင် အသက်ရှင်သန်ရေးအတွက် အခြေခံကျပါသည်။ အပင်နှင့် တိရစ္ဆာန်ဆဲလ်နှစ်မျိုးလုံးတွင် တွေ့ရှိရသော မိုက်တိုခွန်ဒရီယာများကို ဆဲလ်၏ စွမ်းအင်အရင်းအမြစ်အဖြစ် အများအားဖြင့် ရည်ညွှန်းလေ့ရှိသည်။ ၎င်းတို့သည် ဆဲလ်အသက်ရှူခြင်းအတွက် တာဝန်ရှိပြီး ဂလူးကို့စ်ကို အဒီနိုစင်း ထရိုင်ဖော့စဖိတ် (ATP) ပုံစံဖြင့် ဆဲလ်အတွက် အသုံးပြုနိုင်သော စွမ်းအင်အဖြစ် ပြောင်းလဲပေးပါသည်။

ကလိုရိုပလတ်စ်နှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီယာကို ခွဲထုတ်ရန် လိုအပ်ချက်

ဆဲလ်လုပ်ငန်းစဉ်များအကြောင်း ထိုးထွင်းသိမြင်မှုများရရှိရန်နှင့် ရောဂါအမျိုးမျိုးအတွက် အလားအလာရှိသော ကုသမှုများကို တီထွင်ရန် ရည်ရွယ်သည့် သုတေသီများအတွက် ကလိုရိုပလတ်စ်နှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီးယား၏ တစ်ဦးချင်းလုပ်ဆောင်ချက်များနှင့် ဝိသေသလက္ခဏာများကို နားလည်ခြင်းသည် အရေးကြီးပါသည်။ နောက်ထပ် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုနှင့် စမ်းသပ်ချက်များအတွက် သန့်စင်သော နမူနာများရရှိရန် ဆဲလ်အစိတ်အပိုင်းများ၏ ရှုပ်ထွေးသော ရောနှောမှုမှ ဤအင်္ဂါအစိတ်အပိုင်းများကို ခွဲထုတ်ခြင်းသည် အရေးကြီးပါသည်။ ဤခွဲထုတ်ခြင်းကို ဗဟိုခွာခြင်းမှတစ်ဆင့် ဖြစ်နိုင်သည်။

ဗဟိုခွာခြင်း အခြေခံများ

ဗဟိုခွာခြင်းတွင် နမူနာအတွင်းရှိ အစိတ်အပိုင်းများကို ခွဲထုတ်ရန် ဗဟိုခွာအားကို အသုံးပြုခြင်း ပါဝင်သည်။ နမူနာကို ဗဟိုခွာစက်ထဲတွင် ထည့်သည်၊ ၎င်းသည် မြန်နှုန်းမြင့်ဖြင့် လည်ပတ်သော ရိုတာပါသည့် စက်တစ်ခုဖြစ်သည်။ လည်ပတ်နေစဉ်အတွင်း ဗဟိုခွာအားသည် သိပ်သည်းသော အစိတ်အပိုင်းများကို အောက်ခြေတွင် အနည်ကျစေပြီး အလုံးလေးများ ဖြစ်ပေါ်စေပြီး သိပ်သည်းမှုနည်းသော အစိတ်အပိုင်းများမှာ supernatant တွင် ကျန်ရှိနေစေသည်။ ဗဟိုခွာခြင်း၏ အမြန်နှုန်းနှင့် ကြာချိန်အပြင် ဗဟိုခွာပြွန်များ ရွေးချယ်မှုသည် သီးခြားအသုံးချမှုနှင့် နမူနာဖွဲ့စည်းမှုပေါ် မူတည်၍ ကွဲပြားသည်။

အော်ဂဲနယ်ခွဲထုတ်ရန်အတွက် ဒစ်ဖရန်ရှယ် စင်ထရီဖျူးဂန့်

အင်္ဂါအစိတ်အပိုင်းများ ခွဲထုတ်ရန်အတွက် အသုံးအများဆုံး centrifugation နည်းလမ်းမှာ differential centrifugation ဖြစ်သည်။ ဤနည်းစနစ်သည် နမူနာကို မြန်နှုန်းနှင့် ကြာချိန်များ တိုးမြှင့်ခြင်းဖြင့် differential centrifugation အများအပြားဖြင့် ခွဲထုတ်ခြင်း၏ အခြေခံမူအပေါ် အခြေခံသည်။ centrifugation ၏ parameters များကို ချိန်ညှိခြင်းဖြင့် သုတေသီများသည် chloroplasts နှင့် mitochondria များကို အခြားဆဲလ်အစိတ်အပိုင်းများမှ ထိရောက်စွာ ခွဲထုတ်နိုင်သည်။

ကလိုရိုပလတ်စ်နှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီယာကို ခွဲထုတ်ရန် အဆင့်ဆင့်လမ်းညွှန်

အဆင့် ၁: တစ်သားတည်းဖြစ်အောင်ပြုလုပ်ခြင်း

ကွဲပြားသော ဗဟိုခွာရည်ခွဲထုတ်ခြင်း၏ ပထမခြေလှမ်းမှာ နမူနာကို တစ်သားတည်းဖြစ်အောင်ပြုလုပ်ခြင်းဖြစ်သည်။ ဤလုပ်ငန်းစဉ်တွင် ဆဲလ်များကို ညင်သာစွာခွဲ၍ ၎င်းတို့၏အရောအနှောများကို ထုတ်လွှတ်ခြင်းဖြင့် အင်္ဂါအစိတ်အပိုင်းများထဲသို့ ဝင်ရောက်ခွင့်ပေးခြင်း ပါဝင်သည်။ ဆဲလ်ပျက်စီးစေရန်အတွက် စက်ပိုင်းဆိုင်ရာပျက်စီးမှုနှင့် အရည်နိုက်ထရိုဂျင်ကုသမှုကဲ့သို့သော နည်းလမ်းများစွာကို အသုံးပြုနိုင်ပါသည်။

အဆင့် ၂: ဒစ်ဖရန်ရှယ် စင်ထရီဖူဂန့်

တစ်သားတည်းဖြစ်အောင်ပြုလုပ်ပြီးနောက်၊ နမူနာကို ကွဲပြားသော ဗဟိုခွာခြင်းများစွာဖြင့် လုပ်ဆောင်သည်။ ကနဦး အမြန်နှုန်းနိမ့် ဗဟိုခွာခြင်း (1000-2000 xg) သည် ဆဲလ်အပျက်အစီးကြီးများနှင့် မပျက်စီးသေးသောဆဲလ်များကို ဖယ်ရှားပေးပြီး ကုန်ကြမ်းမိုက်တိုခွန်ဒရီးယားနှင့် ကလိုရိုပလတ်စ် အပိုင်းအစများကို ချန်ထားခဲ့သည်။ ထို့နောက် ဤအပိုင်းအစကို ပိုမိုမြင့်မားသော အမြန်နှုန်းမြင့် ဗဟိုခွာခြင်း (10,000-15,000 xg) ဖြင့် လုပ်ဆောင်ပြီး ကလိုရိုပလတ်စ်များကို မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားမှ ခွဲထုတ်သည်။

အဆင့် ၃: သန့်ရှင်းစင်ကြယ်မှု မြှင့်တင်ခြင်း

ရရှိလာသော ကလိုရိုပလတ်စ်နှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီးယား အပိုင်းအစများကို ပိုမိုသန့်စင်ရန်အတွက်၊ နောက်ထပ် centrifugation အဆင့်များကို လုပ်ဆောင်နိုင်ပါသည်။ ၎င်းတွင် centrifugation တစ်ခုစီပြီးနောက် ရရှိလာသော pellet ကို သင့်လျော်သော buffer တွင် ပြန်လည်ရောစပ်ပြီး လုပ်ငန်းစဉ်ကို မြှင့်တင်ထားသော အမြန်နှုန်းနှင့် ကြာချိန်ဖြင့် ထပ်ခါတလဲလဲ လုပ်ဆောင်ခြင်း ပါဝင်သည်။ ဤအပို centrifugation များသည် ကျန်ရှိနေသော ညစ်ညမ်းပစ္စည်းများကို ဖယ်ရှားပေးပြီး နောက်ဆုံး organelle အပိုင်းအစများ၏ သန့်ရှင်းစင်ကြယ်မှုကို မြှင့်တင်ပေးမည်ဖြစ်သည်။

နိဂုံးချုပ်:

ဗဟိုခွာစက်သည် ဆဲလ်ဇီဝဗေဒနယ်ပယ်ကို တော်လှန်ပြောင်းလဲစေခဲ့ပြီး ဆဲလ်အစိတ်အပိုင်းများကို ခွဲထုတ်ရာတွင် မရှိမဖြစ်လိုအပ်သော ကိရိယာတစ်ခုဖြစ်လာခဲ့သည်။ ကွဲပြားသော ဗဟိုခွာစက်ကို အသုံးပြုခြင်းဖြင့် သုတေသီများသည် ကလိုရိုပလတ်စ်နှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားကို အောင်မြင်စွာ ခွဲထုတ်နိုင်ပြီး နောက်ထပ် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုနှင့် စမ်းသပ်မှုများအတွက် အဖိုးတန် သန့်စင်ထားသော နမူနာများကို ပံ့ပိုးပေးနိုင်ပါသည်။ ဤအင်္ဂါအစိတ်အပိုင်းများကို ခွဲထုတ်နိုင်စွမ်းသည် ၎င်းတို့၏ သီးခြားလုပ်ဆောင်ချက်များနှင့် ယန္တရားများကို လေ့လာရန် တံခါးများကို ဖွင့်ပေးပြီး ဆဲလ်လုပ်ငန်းစဉ်များကို ပိုမိုကောင်းမွန်စွာ နားလည်ရန်နှင့် မတူညီသော သိပ္ပံပညာရပ်များတွင် တိုးတက်မှုများကို မြှင့်တင်ရန် အထောက်အကူပြုပါသည်။