Bii a ṣe le ya chloroplast ati mitochondria sọtọ nipasẹ centrifugation

Ìfàmọ́ra: Ọ̀nà Àgbàyanu fún Yíyà Chloroplast àti Mitochondria sọ́tọ̀

Ifihan:

Ìwọ̀n ìyípadà jẹ́ ọ̀nà tí a ń lò fún ìmọ̀ nípa ìṣẹ̀dá ara àti ìṣẹ̀dá ara tí ó ń jẹ́ kí àwọn ẹ̀yà ara sẹ́ẹ̀lì tó yàtọ̀ síra yàtọ̀ síra nípa ìwọ̀n, ìrísí, àti ìwọ̀n wọn. Àpilẹ̀kọ yìí ṣe àgbéyẹ̀wò lílo ìyípadà ara fún yíyà sọ́tọ̀ àwọn chloroplasts àti mitochondria, àwọn ẹ̀yà ara méjì pàtàkì tí a rí nínú àwọn sẹ́ẹ̀lì eukaryotic tí ó ní ipa nínú iṣẹ́dá agbára àti àwọn ìlànà sẹ́ẹ̀lì pàtàkì mìíràn.

Ipa ti Chloroplasts ati Mitochondria ninu Awọn ilana Sẹẹli

Àwọn chloroplast, tí ó wà nínú àwọn sẹ́ẹ̀lì ewéko, ló ń ṣe photosynthesis, ìlànà kan tí ó ń yí agbára ìmọ́lẹ̀ padà sí agbára kẹ́míkà tí a kó pamọ́ sínú ìrísí glucose. Ìlànà pàtàkì yìí ń mú kí ìṣẹ̀dá atẹ́gùn rọrùn, ó sì ṣe pàtàkì fún ìpèsè ẹ̀mí lórí ilẹ̀ ayé. Mitochondria, tí a rí nínú àwọn sẹ́ẹ̀lì ewéko àti ẹranko, ni a sábà máa ń pè ní agbára sẹ́ẹ̀lì náà. Wọ́n ni ó ń ṣe ìmísí sẹ́ẹ̀lì, tí ó ń yí glucose padà sí agbára tí a lè lò fún sẹ́ẹ̀lì ní ìrísí adenosine triphosphate (ATP).

Àìní fún yíyàtọ̀ Chloroplast àti Mitochondria sọ́tọ̀

Lílóye iṣẹ́ àti ànímọ́ ẹnìkọ̀ọ̀kan ti chloroplasts àti mitochondria ṣe pàtàkì fún àwọn olùwádìí tí wọ́n ń gbìyànjú láti ní ìmọ̀ nípa àwọn ìlànà sẹ́ẹ̀lì àti láti ṣe àgbékalẹ̀ àwọn ìtọ́jú tí ó ṣeé ṣe fún onírúurú àìsàn. Yíya àwọn organelles wọ̀nyí sọ́tọ̀ kúrò nínú àdàpọ̀ àwọn èròjà sẹ́ẹ̀lì tí ó díjú jẹ́ pàtàkì láti gba àwọn àpẹẹrẹ mímọ́ fún ìwádìí àti ìdánwò síwájú sí i. Ìyàsọ́tọ̀ yìí ṣeé ṣe nípasẹ̀ centrifugation.

Àwọn Ìpìlẹ̀ centrifugation

Sísúnkì jẹ́ lílo agbára centrifugal láti ya àwọn èròjà inú àpẹẹrẹ kan sọ́tọ̀. A gbé àpẹẹrẹ náà sínú centrifuge kan, ẹ̀rọ kan pẹ̀lú rotor kan tí ó ń yípo ní iyàrá gíga. Nígbà yíyípo, agbára centrifugal náà ń fa kí àwọn èròjà tí ó pọ̀ jù lọ rọ́ sí ìsàlẹ̀, tí ó ń ṣe pellet kan, nígbà tí àwọn èròjà tí kò pọ̀ tó sì wà nínú supernatant. Ìyára àti àkókò centrifugal, àti yíyàn àwọn tube centrifuge, yàtọ̀ síra ní ìbámu pẹ̀lú ohun tí a lò àti ìṣètò àpẹẹrẹ náà.

Ìyàtọ̀ sí Ìpínyà Organelle

Ọ̀nà centrifugation tí a sábà máa ń lò jùlọ fún ìyàsọ́tọ̀ organelle ni differential centrifugation. Ọ̀nà yìí dá lórí ìlànà ìpínkiri àpẹẹrẹ náà nípa fífi sí oríṣiríṣi centrifugations ní àwọn iyàrá àti àkókò tí ó ń pọ̀ sí i. Nípa ṣíṣe àtúnṣe àwọn pàrámítà centrifugation, àwọn olùwádìí lè ya àwọn chloroplast àti mitochondria kúrò lára ​​àwọn èròjà sẹ́ẹ̀lì mìíràn lọ́nà tí ó dára.

Ìtọ́sọ́nà Ìgbésẹ̀-ní-Ìgbésẹ̀ sí Yíyà Chloroplasts àti Mitochondria sọ́tọ̀

Igbesẹ 1: Isọdọkan

Igbesẹ akọkọ ninu centrifugation differential ni isọdọkan ayẹwo naa. Ilana yii ni lati fọ awọn sẹẹli naa ni rọra ati lati tu akoonu wọn silẹ, ti o fun laaye lati wọle si awọn organelles. Ọpọlọpọ awọn ọna ni a le lo fun idamu sẹẹli, gẹgẹbi idamu ẹrọ ati itọju nitrogen olomi.

Igbese 2: Ipinfunni Oniruuru

Lẹ́yìn ìdàpọ̀, a máa ń lo àwọn centrifugations oníyàtọ̀. Ìtẹ̀síwájú ìpele kékeré (1000-2000 xg) láti mú àwọn èérún sẹ́ẹ̀lì ńlá àti àwọn sẹ́ẹ̀lì tí kò tíì fọ́ kúrò, ó sì fi ìpín mitochondria àti chloroplast tí kò ní ìfọ́ sílẹ̀. Lẹ́yìn náà, a máa ń fi centrifugation oníyára gíga (10,000-15,000 xg) ìpín yìí, èyí tí yóò mú kí àwọn chloroplast ya ara wọn sọ́tọ̀ kúrò nínú mitochondria.

Igbesẹ 3: Imudarasi Mimọ

Láti tún sọ àwọn ìpín chloroplast àti mitochondria tí a rí di mímọ́ síi, a lè ṣe àwọn ìgbésẹ̀ centrifugation afikún. Èyí kan fífi àwọn pellet tí a rí lẹ́yìn centrifugation kọ̀ọ̀kan sínú ibi ìpamọ́ tí ó yẹ kí a sì tún ṣe iṣẹ́ náà pẹ̀lú iyàrá àti àkókò tí ó pọ̀ sí i. Àwọn centrifugation afikún wọ̀nyí yóò ran lọ́wọ́ láti mú àwọn èérí tí ó kù kúrò kí ó sì mú kí ìwẹ̀nùmọ́ àwọn ìpín organelle ìkẹyìn pọ̀ sí i.

Ìparí:

Ìmọ́lẹ̀ jẹ́ ọ̀nà ìṣiṣẹ́ tó wọ́pọ̀ tó ti yí ìjìnlẹ̀ nípa ìmọ̀ sẹ́ẹ̀lì padà, ó sì ti di ohun èlò pàtàkì fún ìyàsọ́tọ̀ àwọn ẹ̀yà sẹ́ẹ̀lì. Nípa lílo ìyàsọ́tọ̀ centrifugation, àwọn olùwádìí lè ya àwọn chloroplast àti mitochondria sọ́tọ̀ ní àṣeyọrí, kí wọ́n lè pèsè àwọn àpẹẹrẹ tó wúlò fún ìwádìí àti ìdánwò síwájú sí i. Agbára láti ya àwọn ẹ̀yà ara wọ̀nyí sọ́tọ̀ ṣíṣí ilẹ̀kùn sílẹ̀ fún kíkẹ́kọ̀ọ́ nípa àwọn iṣẹ́ àti ìlànà pàtó wọn, èyí tó ń mú kí òye tó dára nípa àwọn ìlànà sẹ́ẹ̀lì àti gbígbé ìlọsíwájú lárugẹ nínú onírúurú ìmọ̀ sáyẹ́ǹsì.