Okwu Mmalite nke Lysosomes na Peroxisomes
Lysosomes na peroxisomes bụ akụkụ abụọ dị iche iche nke mkpụrụ ndụ nwere ọrụ dị iche iche nke na-arụ ọrụ dị mkpa na metabolism nke mkpụrụ ndụ na homeostasis. Lysosomes bụ akụkụ ahụ nke nwere membrane-ejikọta na enzymes nri nke na-arụ ọrụ maka imebi ihe mkpofu mkpụrụ ndụ, ihe ndị si mba ọzọ, na nje ndị na-akpata ọrịa. Peroxisomes, n'aka nke ọzọ, na-etinye aka na mmeghachi omume metabolic dị iche iche, karịsịa ndị metụtara nsị na metabolism lipid. Iji mụọ akụkụ ndị a iche iche, otu ụzọ a na-ejikarị eme ihe bụ centrifugation. N'isiokwu a, anyị ga-enyocha otu esi eji centrifugation eme ihe iji kewapụ lysosomes na peroxisomes nke ọma.
Ụkpụrụ na Usoro Nhazi Centrifugation
Ịmepụta ihe dị iche iche dịka nha, njupụta, na ọdịdị ha si dị, bụ usoro dị ike e ji ekewapụ ihe dị iche iche dị na ngwakọta dị iche iche dabere na nha ha, njupụta ha, na ọdịdị ha. Ọ na-arụ ọrụ na ụkpụrụ nke imechi ihe, ebe ihe ndị dị arọ na-ada ngwa ngwa n'okpuru mmetụta nke ike centrifugal. Iji kewaa lysosomes na peroxisomes, enwere ike iji usoro centrifugation dị iche iche, dị ka centrifugation differential na density gradient centrifugation, mee ihe.
Ntinye ihe dị iche iche: Ịwepụta Lysosomes na Peroxisomes
Ntinye ihe dị iche iche na-agụnye usoro usoro ntinye ihe dị iche iche na ọsọ na oge dị iche iche iji kewaa organelles dabere na njupụta ha. Lee otu esi eji ya wepụta lysosomes na peroxisomes:
Nzọụkwụ 1: Nhakọrịta
Nzọụkwụ mbụ bụ ịgbawa mkpụrụ ndụ ahụ nwayọ nwayọ ma wepụta ihe dị n'ime ha site na iji usoro homogenization. Enwere ike ime nke a site na iji sonicating ma ọ bụ iji homogenizer pụrụ iche. A na-akpọ ngwakọta a na-esi na ya apụta homogenate.
Nzọụkwụ nke 2: Ntinye Centrifugation dị ala
A na-etinye homogenate ahụ n'ime obere ọsọ (ihe dị ka 1,000-2,000 xg) ruo obere oge. Nzọụkwụ a na-enyere aka ikewapụ ihe mkpofu sel buru ibu na akụkụ nuklia site na akụkụ organelles ndị ọzọ dị na homogenate.
Nzọụkwụ nke 3: Ntinye Centrifugation Ọsọ Dị Mfe
A na-etinye ihe na-esi n'ime mmiri dị arọ dịka lysosomes na peroxisomes n'ime mmiri dị n'ime ya site na usoro centrifugation dị ala (nke ruru 10,000 xg). Nke a na-eme ka ihe dị n'ime mmiri ahụ nwee organelles ndị a.
Nzọụkwụ nke 4: Sachaa ma weghachite ya ọzọ
A na-eji mmiri kwesịrị ekwesị saa mkpụrụ osisi e nwetara n'oge gara aga, wee jiri ya ọzọ dochie ya iji nweta akụkụ lysosome na peroxisome dị ọcha.
Ntinye njupụta nke Gradient: Ịmezi nkewa ahụ
Ngụkọta njupụta nke ihe ndị dị n'ime ya bụ usoro centrifugation dị elu nke na-enye ohere maka nhicha na imeziwanye lysosomes na peroxisomes. N'ime usoro a, a na-eji ihe ngwọta gradient-forming dị ka sucrose ma ọ bụ iodixanol emepụta njupụta njupụta. Lee otu esi etinye ya n'ọrụ:
Nzọụkwụ nke 1: Nkwadebe nke Njupụta Gradient
A na-akwadebe ihe dị njupụta nke ihe dị n'ime ya, dị ka sucrose, n'ime tube centrifuge, nke nwere njupụta dị iche iche site n'elu ruo ala ma ọ bụ ala ruo n'elu. A na-ahọrọ ihe mejupụtara na njupụta nke ihe dị n'ime ihe dị n'ime ihe dị n'ime ya nke ọma, na-eme ka ọ dị mfe karịa peroxisomes mana ọ dị oke njọ karịa lysosomes.
Nzọụkwụ nke 2: Ịmepụta ihe nlele
A na-eji nlezianya kpuchie akụkụ lysosome na peroxisome e weghachitere ewepụtara site na centrifugation dị iche iche n'elu ihe nrịbama njupụta.
Nzọụkwụ nke 3: Ịmepụta Centrifugation
A na-etinye ọkpọkọ ahụ n'ime centrifugation dị elu (ultracentrifugation) iji kewaa lysosomes na peroxisomes dabere na njupụta ha. N'oge centrifugation, organelles na-agafe na etiti ahụ ruo mgbe ha ruru mpaghara ebe njupụta ha na-adakọ na njupụta nke etiti gbara ya gburugburu, na-emepụta eriri dị iche iche.
Nyocha na Ngwa Ndị Ọzọ
Mgbe nkewa nke ọma gasịrị, enwere ike inyocha akụkụ lysosome na peroxisome enwetara site na iji usoro dị iche iche iji chọpụta ịdị ọcha ha, nha ha, ihe mejupụtara ha, na njirimara ọrụ ha. Usoro dịka electron microscopy, immunocytochemistry, na nnwale ọrụ enzyme nwere ike inye nghọta bara uru na akụkụ ndị dịpụrụ adịpụ, na-akwado njirimara na ịdị ọcha ha.
Karịa ebumnuche nyocha, ikike nkewapụ lysosomes na peroxisomes site na centrifugation nwere ojiji na nchọpụta ahụike, mmepe ọgwụ, na ọgwụgwọ. Site n'ịghọta ọrụ nke organelles ndị a nke ọma, ndị ọkà mmụta sayensị nwere ike ịchọpụta usoro ọgwụgwọ ọhụrụ nke na-elekwasị anya na nsogbu lysosomal ma ọ bụ peroxisomal, dị ka ọrịa nchekwa lysosomal ma ọ bụ nsogbu biogenesis peroxisome.
Na mmechi, nkewa nke lysosomes site na peroxisomes site na iji usoro centrifugation, dị ka differential centrifugation na njupụta gradient centrifugation, bụ ụzọ dị mkpa na nnyocha bayọlọji sel. Usoro ndị a na-enyere ndị ọkà mmụta sayensị aka inweta akụkụ dị ọcha nke lysosomes na peroxisomes, na-enyere aka n'ịghọta ọrụ nke ha n'otu n'otu, ụzọ metabolic, na ọgwụgwọ nwere ike inye aka maka ọrịa ndị metụtara ya.
.