mar a sgaradh lysosomes bho peroxisomes le bhith a’ centrifugachadh

Ro-ràdh do Lysosomes agus Peroxisomes

Tha lysosomes agus peroxisomes nan dà organelle cealla fa leth le gnìomhan sònraichte a bhios a’ cluich phàirtean deatamach ann am metabolism ceallach agus homeostasis. Tha lysosomes nan organelles ceangailte ri membran làn einnseanan cnàmhaidh a tha an urra ri bhith a’ briseadh sìos stuthan sgudail ceallach, mìrean cèin, agus pathogens. Tha peroxisomes, air an làimh eile, an sàs ann an grunn ath-bheachdan metabolach, gu sònraichte an fheadhainn co-cheangailte ri dì-phuinnseanachadh agus metabolism lipid. Gus na h-organelles sin a sgrùdadh air leth, is e aon dhòigh a thathas a’ cleachdadh gu cumanta centrifugation. San artaigil seo, rannsaichidh sinn mar a ghabhas centrifugation a chleachdadh gus lysosomes a sgaradh bho peroxisomes gu soirbheachail.

Prionnsabalan agus Dòighean-obrach Meadhan-chonnsachaidh

'S e dòigh chumhachdach a th' ann an ceud-shuidheachadh a thathas a' cleachdadh gus diofar phàirtean de mheasgachadh neo-aonghnèitheach a sgaradh a rèir am meud, an dùmhlachd agus an cumadh. Bidh e ag obair air prionnsapalan drùchdadh, far am bi mìrean nas truime a' socrachadh sìos nas luaithe fo bhuaidh feachd ceud-shuidheachaidh. Gus lysosomes a sgaradh bho peroxisomes, faodar diofar dhòighean ceud-shuidheachaidh, leithid ceud-shuidheachadh eadar-dhealaichte agus ceud-shuidheachadh caisead dùmhlachd, a chleachdadh.

Ceudachadh Eadar-dhealaichte: A’ toirt a-mach Lysosomes agus Peroxisomes

Tha sreath de cheumannan centrifugachaidh aig diofar astaran agus fad a’ toirt a-steach sreath de cheumannan centrifugachaidh gus organelles a sgaradh a rèir an dùmhlachd. Seo mar a ghabhas a chleachdadh gus lysosomes agus peroxisomes a thoirt a-mach:

Ceum 1: Co-chothromachadh

Is e a’ chiad cheum na ceallan a reubadh gu socair agus an susbaint aca a leigeil ma sgaoil le bhith a’ cleachdadh dòigh homogenization. Faodar seo a choileanadh le bhith a’ dèanamh fuaim no a’ cleachdadh homogenizer sònraichte. Canar an homogenate ris a’ mheasgachadh a thig às.

Ceum 2: Meadhanachadh aig astar ìosal

Tha an homogenate an uair sin air a chur fo centrifugation aig astar ìosal (timcheall air 1,000-2,000 xg) airson ùine ghoirid. Bidh an ceum seo a’ cuideachadh le bhith a’ sgaradh sprùilleach cealla nas motha agus an earrann niùclasach bhon chòrr de na h-organelles a tha an làthair anns an homogenate.

Ceum 3: Meadhan-astar Meadhanach-astar

Tha an t-snàth-uachdar a gheibhear bhon cheum meadhan-shuidheachaidh aig astar ìosal air a chur tro mheadhan-astar (timcheall air 10,000 xg) gus organelles trom leithid lysosomes agus peroxisomes a dhòrtadh sìos. Bidh an ceum seo ag adhbhrachadh peileat anns a bheil na h-organelles sin.

Ceum 4: Nigh agus ath-fhuasgail

Tha am peileat a fhuaireadh sa cheum roimhe air a nighe le fuasgladh bufaireach freagarrach agus an uairsin air ath-fhuadachadh gus bloigh lysosome agus peroxisome glan fhaighinn.

Ceum-sgèileadh Dlùthsachd: A’ mìneachadh an dealachaidh

'S e dòigh-obrach adhartach a th' ann an ceud-shuidheachadh le claonadh dùmhlachd a leigeas le tuilleadh glanaidh agus grinneachaidh lysosomes agus peroxisomes. Anns an dòigh-obrach seo, thèid claonadh dùmhlachd a chruthachadh le bhith a' cleachdadh fuasgladh a chruthaicheas claonadh leithid siùcros no iodixanol. Seo mar a ghabhas a chur an sàs:

Ceum 1: Ullachadh Gradient Dlùths

Tha meadhan dùmhlachd-crìonaidh, leithid siùcros, air ullachadh ann an tiùb centrifuge, le dùmhlachdan eadar-dhealaichte bho mhullach gu bonn no bho bhonn gu mullach. Tha co-dhèanamh agus dùmhlachd a’ mheadhain-crìonaidh air an taghadh gu faiceallach, a’ dèanamh cinnteach gu bheil e nas aotroime na peroxisomes ach nas dùmhaile na lysosomes.

Ceum 2: Sreathan den t-Sampall

Tha an co-roinn lysosome agus peroxisome ath-fhulangach a gheibhear bho cheud-sgaradh eadar-dhealaichte air a chur gu faiceallach air mullach a’ mheadhain caisead dùmhlachd.

Ceum 3: Meadhan-chriathradh

An uair sin, thèid an tiùb a chur fo centrifugation aig astar luath (ultracentrifugation) gus lysosomes agus peroxisomes a sgaradh a rèir an dùmhlachd beòthail. Rè an centrifugation, bidh na h-organelles a’ gluasad tron ​​mheadhan gus an ruig iad sgìre far a bheil an dùmhlachd beòthail aca a’ freagairt ri dùmhlachd a’ mheadhain mun cuairt, a’ cruthachadh chòmhlain fa leth.

Mion-sgrùdadh agus Iarrtasan a bharrachd

Às dèidh dealachadh soirbheachail, faodar na bloighean lysosome agus peroxisome a gheibhear a sgrùdadh tuilleadh le bhith a’ cleachdadh diofar dhòighean gus am purrachd, am meud, an co-dhèanamh agus na feartan gnìomhach aca a mheasadh. Faodaidh dòighean leithid microscopaidh dealanach, imdhíon-chito-cheimigeachd, agus deuchainnean gnìomhachd einnsein lèirsinn luachmhor a thoirt seachad air na bloighean aonaraichte, a’ dearbhadh an dearbh-aithne agus an purrachd.

A bharrachd air adhbharan rannsachaidh, tha comas air lysosomes agus peroxisomes a sgaradh tro centrifugation a’ buntainn ri breithneachadh meidigeach, leasachadh dhrogaichean, agus eadar-theachdan leigheasach. Le bhith a’ tuigsinn gnìomhan nan organelles sin nas fheàrr, faodaidh luchd-saidheans ro-innleachdan leigheasach ùra a rannsachadh a tha ag amas air eas-òrdughan lysosomal no peroxisomal, leithid galairean stòraidh lysosomal no eas-òrdughan biogenesis peroxisome.

Mar cho-dhùnadh, tha dealachadh lysosomes bho peroxisomes le bhith a’ cleachdadh dhòighean-obrach centrifugation, leithid centrifugation eadar-dhealaichte agus centrifugation dùmhlachd-gradient, na dhòigh-obrach riatanach ann an rannsachadh bith-eòlas cealla. Leigidh na dòighean seo le luchd-saidheans bloighean glan de lysosomes agus peroxisomes fhaighinn, a’ cuideachadh le bhith a’ tuigsinn an dreuchdan fa leth, slighean metabolach, agus eadar-theachdan leigheasach a dh’ fhaodadh a bhith ann airson galairean co-cheangailte.