周知のとおり、血清分離は難しい問題です。では、遠心分離による血清分離はどのように行うのでしょうか?まず、血清の概念から分析してみましょう。
血清:血液が凝固した後に分離される液体。
血液凝固の本質は、血漿中の可溶性フィブリノゲンが不溶性フィブリンに変換されることです。線維状タンパク質は細い繊維で、血球の網目状に絡み合い、ゲル状の血栓を形成します。血液凝固後30分から1時間で、血栓内の血小板収縮タンパク質が収縮し、血栓が再び固まり、透明な液体が押し出されます。これが血清です。血清は、血液凝固に関与するフィブリノゲンや凝固因子を欠いている点で血漿と異なりますが、凝固中に血小板から放出される少量の物質が含まれています。
それでは、血清分離の目的について改めて説明しましょう。
一般情報:
室温(37度)で30分以上放置した後、遠心分離機を作動させ、3500~4000rpmで5~10分間遠心分離する。血清が分離される。酵素などの指標が分解されやすい場合は、必要に応じて4度で30分以上放置してから遠心分離する。(37度でしばらく放置する目的は、血液が凝固して血清が放出されるようにするためである。血液が凝固するとフィブリンが収縮し、血清が放出される。)
注意が必要な事項
1. 遠心速度が大きすぎるため、溶血を起こしやすい。
2. 動物の血液は、毛髪に付着しないようにしてください。溶血しやすくなります。
ヒント:採血後は、容器を立てたり、平らに置いたり、傾けたりしないでください。そうすることで、血清の沈殿領域が広がり、血清の沈殿が促進されます。
要約すると、重要な問題は、血液を適切に採取し、室温での静置時間を把握し、その後、溶血を避けるために専用の遠心分離機を使用して血清を分離することである。