همانطور که همه ما میدانیم، جداسازی سرم یک مشکل پیچیده است، بنابراین چگونه جداسازی سرم را با سانتریفیوژ انجام دهیم؟ اول از همه، ما از مفهوم سرم تجزیه و تحلیل میکنیم:
سرم خون: مایعی که خون را پس از انعقاد جدا میکند.
ماهیت انعقاد خون تبدیل فیبرینوژن محلول به فیبرین نامحلول در پلاسما است. پروتئینهای فیبری، رشتههای نازکی هستند که به صورت شبکههایی از سلولهای خونی در هم تنیده میشوند و لختههای ژل مانندی را تشکیل میدهند. 30 دقیقه تا 1 ساعت پس از لخته شدن خون، لخته خون در پلاکتها منقبض میشود، به طوری که لخته دوباره سفت میشود و مایع شفافی به نام سرم از آن خارج میشود. سرم با پلاسما متفاوت است زیرا فاقد فیبرینوژن و فاکتورهای انعقادی دخیل در لخته شدن خون است، اما مقدار کمی از موادی را که توسط پلاکتها در طول لخته شدن آزاد میشوند، به آن اضافه کرده است.
پس اجازه دهید به هدف جداسازی سرم برگردم
اطلاعات عمومی:
بیش از نیم ساعت در دمای اتاق (۳۷ درجه) قرار دهید، سانتریفیوژ را روشن کنید و به مدت ۵ تا ۱۰ دقیقه با سرعت ۳۵۰۰ تا ۴۰۰۰ دور در دقیقه سانتریفیوژ کنید. سرم جدا شد. اگر آنزیمهای اندازهگیری و سایر شاخصها به راحتی تجزیه میشوند، با توجه به نیاز، بیش از نیم ساعت در دمای ۴ درجه قرار دهید، سانتریفیوژ کنید. (هدف از قرار دادن آن در دمای ۳۷ درجه برای مدتی، اجازه دادن به خون برای انعقاد و آزاد شدن سرم است، زیرا وقتی خون منعقد میشود، فیبرین منقبض شده و سرم آزاد میشود.)
مواردی که نیاز به توجه دارند
1 سرعت گریز از مرکز خیلی زیاد است و به راحتی باعث همولیز میشود
۲- خون حیوانات، سعی کنید به مو نچسبد، به راحتی همولیز میشود.
نکات: پس از خونگیری، ظرف را به صورت عمودی، صاف یا کج قرار ندهید تا سرم بتواند ناحیه رسوب را گسترش دهد و منجر به رسوب سرم شود.
خلاصه اینکه، مشکل اصلی جمعآوری خوب خون، حفظ دمای اتاق و سپس استفاده از سانتریفیوژ مخصوص برای جداسازی سرم است تا از همولیز جلوگیری شود.