Như chúng ta đã biết, việc tách huyết thanh là một vấn đề phức tạp, vậy làm thế nào để tách huyết thanh bằng phương pháp ly tâm? Trước hết, chúng ta phân tích từ khái niệm về huyết thanh:
Huyết thanh: Chất lỏng tách máu sau quá trình đông máu.
Bản chất của quá trình đông máu là sự chuyển hóa fibrinogen hòa tan thành fibrin không hòa tan trong huyết tương. Các protein dạng sợi là những sợi mỏng đan xen vào nhau tạo thành mạng lưới các tế bào máu, hình thành nên các cục máu đông dạng gel. Từ 30 phút đến 1 giờ sau khi máu đông, cục máu đông co thắt do protein tâm thu của tiểu cầu, khiến cục máu đông cứng lại và tiết ra chất lỏng trong suốt, được gọi là huyết thanh. Huyết thanh khác với huyết tương ở chỗ nó không có fibrinogen và các yếu tố đông máu tham gia vào quá trình đông máu, nhưng lại có thêm một lượng nhỏ các chất được giải phóng bởi tiểu cầu trong quá trình đông máu.
Vậy tôi xin quay lại với mục đích của việc tách huyết thanh.
Thông tin chung:
Để ở nhiệt độ phòng (37 độ C) trong hơn nửa giờ, bật máy ly tâm và ly tâm ở tốc độ 3500-4000 vòng/phút trong 5-10 phút. Huyết thanh được tách ra. Nếu cần đo các enzyme và các chỉ số khác dễ bị phân hủy, thì tùy theo nhu cầu, hãy để ở 4 độ C trong hơn nửa giờ rồi ly tâm. (Mục đích của việc để ở 37 độ C trong một thời gian là để máu đông lại và giải phóng huyết thanh, vì khi máu đông lại, fibrin co lại và huyết thanh được giải phóng.)
Những vấn đề cần chú ý
1. Tốc độ ly tâm quá lớn, dễ gây tan máu.
2. Máu động vật, cố gắng tránh để dính vào lông, dễ gây tan máu.
Lưu ý: Sau khi lấy máu, không đặt bình chứa thẳng đứng, nằm ngang hoặc nghiêng, để huyết thanh có thể lan rộng diện tích lắng đọng, tạo điều kiện thuận lợi cho quá trình lắng đọng huyết thanh.
Tóm lại, vấn đề mấu chốt là phải thu thập máu đúng cách, nắm rõ thời gian để máu ở nhiệt độ phòng ổn định, sau đó sử dụng máy ly tâm chuyên dụng để tách huyết thanh nhằm tránh hiện tượng tan máu.