Ke lebelo lefe la centrifuge la ho arola li-ribosome tsa mahala?

Lebelo la Centrifuge ho Arohanya Li-Ribosome tse sa Lefelloeng: Mokhoa oa Bohlokoa bakeng sa Lipatlisiso tsa Baeloji ea Limolek'hule

Selelekela:

Li-ribosome tse lokolohileng li bapala karolo ea bohlokoa tlhahisong ea protheine, 'me ho li arola ho likarolo tse ling tsa sele ke mosebetsi oa bohlokoa lipatlisisong tsa baeloji ea limolek'hule. Sengoloa sena se hlahloba bohlokoa ba lebelo la centrifuge ho aroleng li-ribosome tse lokolohileng 'me se totobatsa mekhoa e fapaneng ea ts'ebetso ena le lintho tse lokelang ho nahanoa.

I. Ho Utloisisa Li-Ribosome tse sa Lefelloeng:

Ho utloisisa bohlokoa ba lebelo la centrifuge ho aroleng li-ribosome tse lokolohileng, ho bohlokoa ho utloisisa mofuta le mesebetsi ea likarolo tsena tsa sele. Li-ribosome tse lokolohileng ke meaho e menyenyane, e nang le li-granular e fumanoang e phaphametse ka bolokolohi ka har'a cytoplasm, e ikarabellang bakeng sa tlhahiso ea liprotheine ka har'a sele. Ha li na sebopeho se tlamiloeng ka lera, se li khethollang ho li-ribosome tse hoketsoeng ho endoplasmic reticulum. Ho aroloa ha li-ribosome tse lokolohileng ho lumella kutloisiso e tebileng ea mesebetsi ea tsona ea bohlokoa tlhahisong ea protheine ea sele.

II. Melao-motheo ea ho Centrifugation:

Ho arola disele ka sekontiri ke mokhoa o sebediswang haholo ho arola dikarolo tse fapaneng tsa sele ho latela boholo ba tsona, bongata ba tsona le boima ba tsona ba dimolek'hule. Ho kenyeletsa tshebediso ya matla a sekontiri, a hlahiswang ke disampole tse potolohang ka lebelo le phahameng, ho arola ditshila tsa sele, di-organelle le dimolek'hule tse kgolo. Ho fihlella karohano ya di-ribosome tse lokolohileng, ho bohlokwa ho ntlafatsa lebelo la sekontiri le nako ya tsona, kaha dintlha tsena di ama bokgoni ba karohano haholo.

III. Ntlafatso ea Lebelo la Centrifuge:

A. Ho Hlahloba Maemo a Lebelo:

Ho fumana lebelo le nepahetseng la centrifuge bakeng sa ho arola li-ribosome tse lokolohileng ho itšetlehile ka lintlha tse 'maloa, ho kenyeletsoa mofuta oa sampole le boemo ba bohloeki bo lakatsehang. Ka kakaretso, bafuputsi ba sebetsa ka har'a mefuta e mengata ea lebelo, ho qala ka lebelo le tlase ho ea ho tlosa lithōle tse kholo tsa sele le ho eketseha butle-butle. Lebelo le nepahetseng ka ho fetisisa hangata le oela pakeng tsa 10,000 le 100,000 xg, ka liphetoho tse ipapisitseng le litšobotsi tse itseng tsa sampole.

B. Litšobotsi tsa Mohlala:

Lisele le lisele tse fapaneng li na le tekanyo e fapaneng ea bongata ba li-ribosome. Mohlala, lisele tse nang le sekhahla se phahameng sa metabolism, joalo ka lisele tsa mesifa kapa sebete, hangata li na le li-ribosome tse ngata. Lebelo la centrifuge le hloka ho fetoloa ho latela ho fumana katleho e lakatsehang ea karohano.

IV. Mekhoa ea ho Centrifugation bakeng sa ho Itšehlanya ha Ribosome e sa Lefelloeng:

A. Tokisetso ea Sampole:

Ho arola li-ribosome tse lokolohileng ka katleho, ho lokisoa ha sampole ka nepo hoa bohlokoa. Mekhoa ea ho lahla lisele, joalo ka ho lahla lisele kapa ho li sitisa ka lisele ho sebelisoa sesepa, e tlameha ho sebelisoa ho roba lisele le ho lokolla lintho tse ka hare ho tsona. Ka mor'a moo, lisampole tse lahlehileng li feta mehatong e mengata ea ho ntsha lithōle, e leng se hlahisang supernatant e hlakileng e nang le li-ribosome.

B. Phapang ea ho Fokotsa Matla:

Ho potoloha ha differential, e leng mokhoa o sebediswang haholo, ho kenyelletsa ho potoloha ho mmalwa ho latellanang ka ho eketsa lebelo la ho potoloha ha disele. Mokgwa ona o dumella bafuputsi ho arola di-ribosome ho tswa dikarolong tse ding tsa sele ka katleho. Ho potoloha ha pele ka lebelo le tlase ho tlosa masalla a sele, ho latelwa ke lebelo le mahareng ho arola di-organelle le diprotheine tse kgolo tsa sele. Qetellong, ho potoloha ka lebelo le phahameng ho sebediswa ho fumana karolo e lakatsehang e ruileng ka di-ribosome tse lokolohileng.

C. Ho Fokotsa Khanya ea Gradient:

Ho kopanya di-gradient ho sebedisa di-gradient media tse nang le di-gradient tse ngata, tse kang sucrose kapa cesium chloride, ho arola di-ribosome ho latela bongata ba tsona bo boeang. Ka ho beha sampole hodima gradient e nang le di-gradient tse ngata le ho kopanya ka lebelo le laolwang, di-ribosome di ka arolwa ka qeto e eketsehileng. Mokgwa ona o fana ka bohloeki bo ntlafetseng mme o dumella ho arolwa ha dihlopha tse fapaneng tsa di-ribosome ho latela sekgahla sa tsona sa ho senyeha.

V. Lintlha tse Amang Ntlafatso ea Lebelo la Centrifuge:

A. Buka ea Mohlala:

Bophahamo ba sampole bo ama haholo ntlafatso ea lebelo la centrifuge. Bophahamo bo boholo ba sampole bo ka hloka linako tse telele tsa centrifuge kapa lebelo le phahameng ho netefatsa karohano e lekaneng. Leha ho le joalo, ho bohlokoa ho hlokomela hore lebelo le feteletseng kapa linako tse telele tsa centrifuge li ka lebisa tšenyo ea ribosome le ho ama liteko tse latelang.

B. Mofuta oa Rotor:

Lirothara tse fapaneng tsa centrifuge li na le meeli e fapaneng ea lebelo le bokhoni bo phahameng ka ho fetisisa ba rothara bo khothaletsoang. Ho khetha rothara e loketseng ho bohlokoa ho qoba tšenyo ea lisebelisoa le ho boloka karohano e nepahetseng. Ho bohlokoa ho sheba bukana ea mosebelisi ea centrifuge le likhothaletso tsa moetsi ha u khetha mofuta oa rothara ho latela lebelo le lakatsehang le bophahamo ba sampole.

Qetello:

Ho ntlafatsa lebelo la centrifuge ho bohlokoa bakeng sa karohano e atlehileng ea li-ribosome tse lokolohileng, e leng se nolofalletsang thuto ea karolo ea tsona tlhahisong ea protheine ea sele. Ka ho latela melaoana e itseng le ho nahana ka litšobotsi tsa sampole, bafuputsi ba ka arola li-ribosome tse lokolohileng ka katleho, ba fana ka temohisiso ea bohlokoa mabapi le mesebetsi ea tsona le likamano tsa tsona tikolohong ea sele.