ຄວາມໄວຂອງເຄື່ອງ centrifuge ເພື່ອແຍກ ribosome ທີ່ເປັນອິດສະຫຼະ

ຄວາມໄວຂອງເຄື່ອງປັ່ນແຍກເພື່ອແຍກ Ribosome ທີ່ເປັນອິດສະຫຼະ: ເຕັກນິກທີ່ສຳຄັນສຳລັບການຄົ້ນຄວ້າຊີວະວິທະຍາໂມເລກຸນ

ບົດນໍາ:

ໄຣໂບໂຊມອິດສະຫຼະມີບົດບາດສຳຄັນໃນການສັງເຄາະໂປຣຕີນ, ແລະ ການແຍກພວກມັນອອກຈາກອົງປະກອບຂອງຈຸລັງອື່ນໆແມ່ນໜ້າວຽກພື້ນຖານໃນການຄົ້ນຄວ້າຊີວະວິທະຍາໂມເລກຸນ. ບົດຄວາມນີ້ສຳຫຼວດຄວາມສຳຄັນຂອງຄວາມໄວຂອງເຄື່ອງປັ່ນແຍກໃນການແຍກໄຣໂບໂຊມອິດສະຫຼະ ແລະ ເນັ້ນໃສ່ໂປໂຕຄອນ ແລະ ການພິຈາລະນາຕ່າງໆສຳລັບຂະບວນການນີ້.

I. ການເຂົ້າໃຈ Ribosome ອິດສະຫຼະ:

ເພື່ອເຂົ້າໃຈຄວາມສຳຄັນຂອງຄວາມໄວຂອງເຄື່ອງ centrifuge ໃນການແຍກ ribosome ອິດສະຫຼະ, ມັນຈຳເປັນຕ້ອງເຂົ້າໃຈລັກສະນະ ແລະ ໜ້າທີ່ຂອງອົງປະກອບຂອງຈຸລັງເຫຼົ່ານີ້. ribosome ອິດສະຫຼະແມ່ນໂຄງສ້າງຂະໜາດນ້ອຍ, ລະອຽດອ່ອນທີ່ພົບເຫັນລອຍຢູ່ໃນ cytoplasm, ເຊິ່ງຮັບຜິດຊອບຕໍ່ການສັງເຄາະໂປຣຕີນພາຍໃນຈຸລັງ. ພວກມັນບໍ່ມີໂຄງສ້າງທີ່ຜູກມັດກັບເຍື່ອຫຸ້ມເຊລ, ເຊິ່ງແຍກພວກມັນອອກຈາກ ribosome ທີ່ຕິດກັບ reticulum endoplasmic. ການແຍກ ribosome ອິດສະຫຼະຊ່ວຍໃຫ້ມີຄວາມເຂົ້າໃຈຢ່າງເລິກເຊິ່ງກ່ຽວກັບບົດບາດສຳຄັນຂອງພວກມັນໃນການຜະລິດໂປຣຕີນຂອງຈຸລັງ.

II. ຫຼັກການຂອງການປั่นແຍກ:

ການປั่นແຍກເປັນເຕັກນິກທີ່ໃຊ້ກັນຢ່າງກວ້າງຂວາງເພື່ອແຍກສ່ວນປະກອບຂອງເຊວຕ່າງໆໂດຍອີງໃສ່ຂະໜາດ, ຄວາມໜາແໜ້ນ ແລະ ນ້ຳໜັກໂມເລກຸນຂອງມັນ. ມັນກ່ຽວຂ້ອງກັບການນຳໃຊ້ແຮງໜີສູນກາງ, ເຊິ່ງສ້າງຂຶ້ນໂດຍການໝຸນຕົວຢ່າງດ້ວຍຄວາມໄວສູງ, ເພື່ອແຍກຊາກເຊວ, ອໍແກແນລ ແລະ ມະຫາໂມເລກຸນ. ເພື່ອໃຫ້ບັນລຸການແຍກໄຣໂບໂຊມອິດສະຫຼະ, ມັນເປັນສິ່ງສຳຄັນທີ່ຈະຕ້ອງເພີ່ມປະສິດທິພາບຄວາມໄວ ແລະ ໄລຍະເວລາຂອງເຄື່ອງປั่นແຍກ, ຍ້ອນວ່າປັດໄຈເຫຼົ່ານີ້ມີຜົນກະທົບຢ່າງຫຼວງຫຼາຍຕໍ່ປະສິດທິພາບການແຍກ.

III. ການເພີ່ມປະສິດທິພາບຄວາມໄວຂອງເຄື່ອງປั่นແຍກ:

ກ. ການສຳຫຼວດຂອບເຂດຄວາມໄວ:

ການກຳນົດຄວາມໄວຂອງເຄື່ອງ centrifuge ທີ່ເໝາະສົມສຳລັບການແຍກ ribosome ອິດສະຫຼະແມ່ນຂຶ້ນກັບຫຼາຍປັດໃຈ, ລວມທັງປະເພດຕົວຢ່າງ ແລະ ລະດັບຄວາມບໍລິສຸດທີ່ຕ້ອງການ. ໂດຍທົ່ວໄປ, ນັກຄົ້ນຄວ້າເຮັດວຽກພາຍໃນລະດັບຄວາມໄວທີ່ກວ້າງຂວາງ, ເລີ່ມຕົ້ນຈາກຄວາມໄວຕໍ່າໄປຫາການກຳຈັດສິ່ງເສດເຫຼືອຂອງຈຸລັງຂະໜາດໃຫຍ່ ແລະ ເພີ່ມຂຶ້ນເທື່ອລະກ້າວ. ລະດັບຄວາມໄວທີ່ດີທີ່ສຸດມັກຈະຢູ່ລະຫວ່າງ 10,000 ຫາ 100,000 xg, ໂດຍມີການປ່ຽນແປງໂດຍອີງໃສ່ລັກສະນະສະເພາະຂອງຕົວຢ່າງ.

ຂ. ຄຸນລັກສະນະຂອງຕົວຢ່າງ:

ຈຸລັງ ແລະ ເນື້ອເຍື່ອທີ່ແຕກຕ່າງກັນມີລະດັບຄວາມອຸດົມສົມບູນຂອງ ribosome ທີ່ແຕກຕ່າງກັນ. ຕົວຢ່າງ, ເນື້ອເຍື່ອທີ່ມີອັດຕາການເຜົາຜານອາຫານສູງກວ່າ, ເຊັ່ນ: ຈຸລັງກ້າມຊີ້ນ ຫຼື ຈຸລັງຕັບ, ໂດຍທົ່ວໄປແລ້ວມີ ribosome ຫຼາຍກວ່າ. ຄວາມໄວຂອງເຄື່ອງ centrifuge ຕ້ອງໄດ້ຮັບການປັບຕາມຄວາມເໝາະສົມເພື່ອໃຫ້ໄດ້ປະສິດທິພາບການແຍກທີ່ຕ້ອງການ.

IV. ໂປໂຕຄອນການປั่นແຍກ ສຳລັບການແຍກໄຣໂບໂຊມໂດຍບໍ່ເສຍຄ່າ:

ກ. ການກະກຽມຕົວຢ່າງ:

ເພື່ອແຍກໄຣໂບໂຊມອິດສະຫຼະໄດ້ຢ່າງສຳເລັດຜົນ, ການກະກຽມຕົວຢ່າງທີ່ເໝາະສົມແມ່ນມີຄວາມສຳຄັນຫຼາຍ. ເຕັກນິກການແຍກຈຸລັງ, ເຊັ່ນ: ການໃຊ້ຄື້ນສຽງ ຫຼື ການທຳລາຍຈຸລັງໂດຍໃຊ້ຜົງຊັກຟອກ, ຕ້ອງຖືກນຳໃຊ້ເພື່ອທຳລາຍຈຸລັງທີ່ເປີດ ແລະ ປ່ອຍເນື້ອໃນຂອງມັນອອກ. ຫຼັງຈາກນັ້ນ, ຕົວຢ່າງທີ່ຖືກແຍກອອກມາຈະຜ່ານຂັ້ນຕອນການປั่นແຍກເພື່ອການກຳຈັດສິ່ງເສດເຫຼືອ, ເຊິ່ງຈະໃຫ້ໄດ້ນ້ຳໃສທີ່ມີໄຣໂບໂຊມ.

ຂ. ການປั่นແຍກແບບດິຟເຟີເຣນຊຽລ:

ການປั่นແຍກແບບດິຟເຟີເຣນຊຽລ, ເຊິ່ງເປັນເຕັກນິກທີ່ໃຊ້ກັນທົ່ວໄປ, ກ່ຽວຂ້ອງກັບການໝຸນຕາມລຳດັບຫຼາຍຄັ້ງດ້ວຍຄວາມໄວຂອງການປั่นແຍກທີ່ເພີ່ມຂຶ້ນ. ວິທີການນີ້ຊ່ວຍໃຫ້ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດແຍກໄຣໂບໂຊມອອກຈາກອົງປະກອບຂອງຈຸລັງອື່ນໆໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິພາບ. ການໝຸນຄວາມໄວຕ່ຳໃນເບື້ອງຕົ້ນຈະກຳຈັດສິ່ງເສດເຫຼືອຂອງຈຸລັງ, ຕາມດ້ວຍຄວາມໄວປານກາງເພື່ອແຍກອໍແກແນລ ແລະ ໂປຣຕີນຂອງຈຸລັງຂະໜາດໃຫຍ່. ສຸດທ້າຍ, ການໝຸນຄວາມໄວສູງຖືກນຳໃຊ້ເພື່ອໃຫ້ໄດ້ສ່ວນທີ່ຕ້ອງການທີ່ອຸດົມໄປດ້ວຍໄຣໂບໂຊມອິດສະຫຼະ.

ຄ. ການປั่นແຍກແບບ Gradient:

ການປั่นແຍກແບບ gradient ໃຊ້ສື່ກາງທີ່ມີຄວາມໜາແໜ້ນເຊັ່ນ: ຊູໂຄຣສ ຫຼື ຊີຊຽມຄລໍໄຣດ໌ ເພື່ອແຍກໄຣໂບໂຊມໂດຍອີງໃສ່ຄວາມໜາແໜ້ນທີ່ລອຍຕົວຂອງມັນ. ໂດຍການວາງຕົວຢ່າງເປັນຊັ້ນໆໃສ່ຄວາມໜາແໜ້ນ ແລະ ການປั่นແຍກດ້ວຍຄວາມໄວທີ່ຄວບຄຸມ, ໄຣໂບໂຊມສາມາດແຍກອອກໄດ້ດ້ວຍຄວາມລະອຽດທີ່ເພີ່ມຂຶ້ນ. ເຕັກນິກນີ້ສະເໜີຄວາມບໍລິສຸດທີ່ດີຂຶ້ນ ແລະ ຊ່ວຍໃຫ້ສາມາດແຍກໄຣໂບໂຊມຍ່ອຍທີ່ແຕກຕ່າງກັນໂດຍອີງໃສ່ອັດຕາການຕົກຕະກອນຂອງມັນ.

V. ປັດໄຈທີ່ມີຜົນກະທົບຕໍ່ການເພີ່ມປະສິດທິພາບຄວາມໄວຂອງເຄື່ອງປั่นແຍກ:

ກ. ປະລິມານຕົວຢ່າງ:

ປະລິມານຂອງຕົວຢ່າງມີຜົນກະທົບຢ່າງຫຼວງຫຼາຍຕໍ່ການເພີ່ມປະສິດທິພາບຄວາມໄວຂອງການປั่นແຍກ. ປະລິມານຕົວຢ່າງທີ່ໃຫຍ່ກວ່າອາດຕ້ອງໃຊ້ເວລາໃນການປั่นແຍກດົນກວ່າ ຫຼື ຄວາມໄວສູງກວ່າເພື່ອຮັບປະກັນການແຍກທີ່ພຽງພໍ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ມັນເປັນສິ່ງສຳຄັນທີ່ຈະຕ້ອງສັງເກດວ່າຄວາມໄວທີ່ເກີນ ຫຼື ເວລາໃນການປั่นແຍກທີ່ຍາວນານອາດຈະນຳໄປສູ່ຄວາມເສຍຫາຍຂອງ ribosome ແລະ ສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ການທົດລອງຕໍ່ມາ.

ຂ. ປະເພດໂຣເຕີ:

ໂຣເຕີຂອງເຄື່ອງ centrifuge ທີ່ແຕກຕ່າງກັນມີຂີດຈຳກັດຄວາມໄວ ແລະ ຄວາມຈຸສູງສຸດຂອງໂຣເຕີທີ່ແນະນຳແຕກຕ່າງກັນ. ການເລືອກໂຣເຕີທີ່ເໝາະສົມແມ່ນມີຄວາມສຳຄັນຫຼາຍເພື່ອຫຼີກເວັ້ນການເສຍຫາຍຂອງອຸປະກອນ ແລະ ຮັກສາການແຍກທີ່ຖືກຕ້ອງ. ມັນເປັນສິ່ງສຳຄັນທີ່ຈະຕ້ອງປຶກສາຄູ່ມືຜູ້ໃຊ້ຂອງເຄື່ອງ centrifuge ແລະ ຄຳແນະນຳຂອງຜູ້ຜະລິດເມື່ອເລືອກປະເພດໂຣເຕີໂດຍອີງໃສ່ຄວາມໄວ ແລະ ປະລິມານຕົວຢ່າງທີ່ຕ້ອງການ.

ສະຫຼຸບ:

ການເພີ່ມປະສິດທິພາບຄວາມໄວໃນການປັ່ນແຍກແມ່ນມີຄວາມສໍາຄັນຫຼາຍຕໍ່ການແຍກ ribosome ທີ່ເປັນອິດສະຫຼະ, ເຊິ່ງເຮັດໃຫ້ສາມາດສຶກສາບົດບາດຂອງມັນໃນການສັງເຄາະໂປຣຕີນຂອງເຊວ. ໂດຍການປະຕິບັດຕາມໂປໂຕຄອນສະເພາະ ແລະ ການພິຈາລະນາຄຸນລັກສະນະຂອງຕົວຢ່າງ, ນັກຄົ້ນຄວ້າສາມາດແຍກ ribosome ທີ່ເປັນອິດສະຫຼະໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິພາບ, ເຊິ່ງໃຫ້ຄວາມເຂົ້າໃຈທີ່ມີຄຸນຄ່າກ່ຽວກັບໜ້າທີ່ ແລະ ການພົວພັນຂອງພວກມັນພາຍໃນສະພາບແວດລ້ອມຂອງເຊວ.