Kedu ọsọ centrifuge iji kewaa ribosomes efu

Ọsọ Centrifuge iji kewaa Ribosomes n'efu: Usoro dị mkpa maka Nnyocha Bayọlọjik Molekụla

Okwu Mmalite:

Ribosome ndị a na-akpọ "free ribosomes" na-arụ ọrụ dị oke mkpa na mmepụta protein, ikewapụ ha na ihe ndị ọzọ dị na mkpụrụ ndụ bụkwa ọrụ dị mkpa na nchọpụta bayọlọji molekul. Isiokwu a na-enyocha mkpa ọsọ centrifuge dị n'ikewa ribosome ndị a na-akpọ "free ribosomes" ma na-akọwapụta usoro na ihe dị iche iche a na-atụle maka usoro a.

I. Ịghọta Ribosomes Ndị Nwere Onwe:

Iji ghọta mkpa ọsọ centrifuge dị n'ịwapụ ribosomes ndị nwere onwe ha, ọ dị mkpa ịghọta ọdịdị na ọrụ nke ihe ndị a dị na sel. Ribosomes ndị nwere onwe ha bụ obere ihe owuwu granular dị iche iche a na-ahụ na-ese n'ime cytoplasm, na-ahụ maka mmepụta protein n'ime sel. Ha enweghị ihe owuwu nke membrane-ejikọta, na-ekewa ha na ribosomes ndị ejikọtara na endoplasmic reticulum. Ikewapụ nke ribosomes ndị nwere onwe ha na-enye ohere maka nghọta miri emi nke ọrụ dị mkpa ha na mmepụta protein sel.

II. Ụkpụrụ nke Centrifugation:

Centrifugation bụ usoro a na-ejikarị eme ihe iji kewaa ihe dị iche iche dị na sel dabere na nha ha, njupụta ha, na ibu molekul. Ọ gụnyere itinye ike centrifugal, nke a na-emepụta site na ihe nlele na-agbagharị n'ọsọ dị elu, iji kewaa ihe mkpofu sel, organelles, na macromolecules. Iji nweta ikewapụ nke ribosomes efu, ọ dị mkpa ime ka ọsọ na ogologo oge centrifuge dịkwuo mma, ebe ihe ndị a na-emetụta arụmọrụ nkewa nke ukwuu.

III. Nhazi ọsọ centrifuge:

A. Ịchọgharị oke ọsọ:

Ịchọpụta ọsọ centrifuge kwesịrị ekwesị maka ikewapụ ribosomes efu dabere na ọtụtụ ihe, gụnyere ụdị ihe nlele na ọkwa ịdị ọcha achọrọ. N'ozuzu, ndị nchọpụta na-arụ ọrụ n'ọtụtụ ọsọ dị iche iche, na-amalite site na obere ọsọ ruo na iwepụ ihe mkpofu sel buru ibu ma na-amụba nwayọ nwayọ. Oke ọsọ kacha mma na-adakarị n'etiti 10,000 ruo 100,000 xg, yana mgbanwe dabere na njirimara ihe nlele akọwapụtara.

B. Àgwà ihe atụ:

Mkpụrụ ndụ na anụ ahụ dị iche iche nwere oke ribosome dị iche iche. Dịka ọmụmaatụ, anụ ahụ nwere oke metabolic dị elu, dịka akwara ma ọ bụ mkpụrụ ndụ imeju, na-enwekarị ribosomes karịa. Ọ dị mkpa ka a gbanwee ọsọ centrifuge ahụ dịka o kwesịrị iji nweta arụmọrụ nkewa achọrọ.

IV. Usoro nhazi centrifugation maka mwepụta ribosome n'efu:

A. Nkwadebe ihe atụ:

Iji kewapụ ribosomes ndị na-enweghị ihe ọ bụla nke ọma, nkwadebe kwesịrị ekwesị dị oke mkpa. A ga-etinye usoro lysis cell, dị ka sonication ma ọ bụ disruption cell site na iji ihe nhicha, iji gbajie mkpụrụ ndụ mepere emepe ma wepụta ihe dị n'ime ha. Mgbe nke ahụ gasịrị, ihe nlele lysed na-agafe usoro centrifugation maka iwepụ ihe mkpofu, na-emepụta ihe dị n'elu mmiri nke nwere ribosomes.

B. Ntinye ihe dị iche iche:

Usoro dị iche iche nke centrifugation, nke a na-ejikarị eme ihe, gụnyere ọtụtụ ntụgharị usoro na-abawanye ọsọ centrifuge. Usoro a na-enye ndị nchọpụta ohere ikewapụ ribosomes site na ihe ndị ọzọ dị na sel nke ọma. Mgbanwe obere ọsọ mbụ na-ewepụ ihe mkpofu sel, wee soro ọsọ dị n'etiti iji kewapụ organelles na protein sel buru ibu. N'ikpeazụ, a na-eji ntụgharị dị elu iji nweta akụkụ achọrọ nke bara ụba na ribosomes efu.

C. Nhazi nke Gradient:

Njide gradient na-eji mgbasa ozi njupụta gradient, dị ka sucrose ma ọ bụ cesium chloride, kewapụ ribosomes dabere na njupụta buoyant ha. Site n'itinye ihe nlele ahụ n'elu gradient njupụta na centrifuging na ọsọ a na-achịkwa, enwere ike ikewapụ ribosomes na mkpebi ka mma. Usoro a na-enye ịdị ọcha ka mma ma na-enye ohere maka ikewapụ nke obere klas ribosome dị iche iche dabere na ọnụego sedimentation ha.

V. Ihe Ndị Na-emetụta Nhazi Ọsọ Centrifuge:

A. Olu ihe atụ:

Olu nke ihe nlele ahụ na-emetụta nke ukwuu n'otú e si eme ka ọsọ centrifuge dịkwuo mma. Oke ihe nlele buru ibu nwere ike ịchọ oge centrifuge ogologo ma ọ bụ ọsọ dị elu iji hụ na nkewa zuru oke. Agbanyeghị, ọ dị mkpa ịmara na oke ọsọ ma ọ bụ oge centrifugation ogologo oge nwere ike ibute mmebi ribosome ma metụta nnwale ndị na-esote.

Ụdị Rotor B.:

Rotọ centrifuge dị iche iche nwere oke ọsọ dị iche iche na ikike rotor kachasị akwadoro. Ịhọrọ rotor kwesịrị ekwesị dị oke mkpa iji zere mmebi akụrụngwa ma nọgide na-enwe nkewa ziri ezi. Ọ dị mkpa ịga leta akwụkwọ ntuziaka onye ọrụ centrifuge na ndụmọdụ nke onye nrụpụta mgbe ị na-ahọrọ ụdị rotor dabere na ọsọ achọrọ na olu ihe nlele.

Mmechi:

Ịhazi ọsọ centrifuge dị oke mkpa maka nkewa nke ribosomes efu nke ọma, na-eme ka ọmụmụ ihe banyere ọrụ ha na mmepụta protein sel. Site n'ịgbaso usoro ụfọdụ na ịtụle njirimara ihe atụ, ndị nchọpụta nwere ike ikewapụ ribosomes efu nke ọma, na-enye nghọta bara uru banyere ọrụ na mmekọrịta ha n'ime gburugburu sel.