ဗဟိုခွာစက်ဖြင့် အလွယ်တကူ ခွဲထုတ်၍မရသော အင်္ဂါနှစ်ခု

ဆဲလ်အောက် ခွဲထုတ်ခြင်း- နျူကလိယနှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီယာ ခွဲထုတ်ခြင်းဆိုင်ရာ စိန်ခေါ်မှုကို ကျော်လွှားခြင်း

မိတ်ဆက်:

ဗဟိုခွာခြင်းဆိုသည်မှာ ဆဲလ်နှင့် မော်လီကျူးဇီဝဗေဒတွင် မတူညီသော ရောနှောမှုမှ အမျိုးမျိုးသော အော်ဂဲနစ်များကို ခွဲထုတ်ရန်နှင့် သီးခြားခွဲထုတ်ရန် အသုံးပြုသည့် အစွမ်းထက်သော နည်းပညာတစ်ခုဖြစ်သည်။ ဤလုပ်ငန်းစဉ်သည် ကွဲပြားသော အနည်ထိုင်ခြင်း၏ မူပေါ်တွင် အခြေခံထားပြီး၊ ပိုလေးသော အော်ဂဲနစ်များသည် ဗဟိုခွာအားအောက်တွင် ပြွန်၏အောက်ခြေတွင် စုပုံနေသည်။ သို့သော်၊ ဤစည်းမျဉ်းအတွက် ခြွင်းချက်အနည်းငယ်ရှိပြီး ဗဟိုခွာခြင်းဖြင့် အလွယ်တကူ မခွဲထုတ်နိုင်သော အော်ဂဲနစ်နှစ်ခုမှာ နျူကလိယနှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားတို့ဖြစ်သည်။ ဤဆောင်းပါးတွင်၊ ဤအရေးကြီးသော အော်ဂဲနစ်နှစ်ခုကို ခွဲထုတ်ရာတွင် ပါဝင်သော စိန်ခေါ်မှုများ၊ အချို့သော စမ်းသပ်ချက်များတွင် ၎င်းတို့၏ ပူးတွဲသန့်စင်မှု၏ အရေးပါမှုနှင့် ဤအတားအဆီးကို ကျော်လွှားရန် အခြားနည်းလမ်းများကို ကျွန်ုပ်တို့ လေ့လာပါမည်။

၁။ နျူကလိယနှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီယာ၏ ရှုပ်ထွေးမှု-

ဆဲလ်၏ အမိန့်ပေးဗဟိုအဖြစ် မကြာခဏရည်ညွှန်းလေ့ရှိသော နျူကလိယများသည် မျိုးရိုးဗီဇပစ္စည်းများကို ထားရှိခြင်းနှင့် မျိုးရိုးဗီဇဖော်ပြမှုကို ထိန်းညှိပေးခြင်းအတွက် တာဝန်ရှိပါသည်။ အခြားတစ်ဖက်တွင်မူ မိုက်တိုခွန်ဒရီယာများသည် အဒီနိုစင်း ထရိုင်ဖော့စဖိတ် (ATP) ပုံစံဖြင့် စွမ်းအင်ထုတ်လုပ်ပေးသည့် အရေးကြီးသော စွမ်းအားကြီးသော ဆဲလ်များဖြစ်သည်။ ၎င်းတို့၏ ထူးခြားသော အခန်းကဏ္ဍများနှင့် ထူးခြားသော ဖွဲ့စည်းပုံဆိုင်ရာ ဝိသေသလက္ခဏာများကြောင့် ဤအင်္ဂါနှစ်ခုကို ခွဲထုတ်ခြင်းသည် သိသာထင်ရှားသော စိန်ခေါ်မှုတစ်ရပ် ဖြစ်စေနိုင်သည်။

၂။ ပူးတွဲသန့်စင်ခြင်း၏ အရေးပါမှု-

သီးခြားစမ်းသပ်မှုများအတွက် တစ်ဦးချင်းအင်္ဂါအစိတ်အပိုင်းများကို သန့်စင်ပေးခြင်းသည် လိုလားဖွယ်ကောင်းသော်လည်း၊ နျူကလိယနှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားတို့၏ ပူးတွဲသန့်စင်မှုသည် အလွန်အရေးကြီးသော ဖြစ်ရပ်များရှိပါသည်။ ဥပမာအားဖြင့်၊ မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားဇီဝဖြစ်စဉ်ပြောင်းလဲမှုများအပေါ် တုံ့ပြန်သည့်အနေဖြင့် မျိုးဗီဇဖော်ပြမှုထိန်းညှိမှုကို လေ့လာသည့်အခါ၊ မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားချို့ယွင်းမှုသည် နျူကလီးယားမျိုးဗီဇဖော်ပြမှုအပေါ် သက်ရောက်မှုကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာရန် အရေးကြီးပါသည်။ ထိုကဲ့သို့သောကိစ္စများတွင်၊ မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားမှ နျူကလိယကို ခွဲထုတ်ခြင်းသည် မပြည့်စုံသော ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုနှင့် မတိကျသော အဓိပ္ပာယ်ဖွင့်ဆိုချက်များကို ဖြစ်ပေါ်စေပါသည်။

၃။ ရိုးရာဗဟိုခွာစက်၏ ကန့်သတ်ချက်များ-

ရိုးရာ centrifugation နည်းလမ်းများသည် differential centrifugation ကို အသုံးပြုကြပြီး၊ ၎င်းသည် အရွယ်အစားနှင့် သိပ်သည်းဆဖြင့် organelles များကို ခွဲခြားရန် မတူညီသော အမြန်နှုန်းများဖြင့် centrifugation အဆင့်များစွာ ပါဝင်သည်။ ကံမကောင်းစွာပဲ၊ nuclei နှင့် mitochondria တို့သည် သိပ်သည်းဆထပ်နေပြီး အလားတူ အနည်ထိုင်ဂုဏ်သတ္တိများ ရှိသောကြောင့် ဤနည်းလမ်းတစ်ခုတည်းကို အသုံးပြု၍ ၎င်းတို့ကို ခွဲခြားရန် မဖြစ်နိုင်သလောက်ဖြစ်သည်။ ၎င်းသည် အဓိကအားဖြင့် organelles နှစ်ခုလုံးတွင် lipid ပါဝင်မှု မြင့်မားခြင်းကြောင့် ၎င်းတို့၏ ပေါလောမျောနိုင်စွမ်းကို တူညီစေပြီး centrifugation အတွင်း ပူးတွဲအနည်ထိုင်ခြင်းကို ဖြစ်ပေါ်စေပါသည်။

၄။ သီးခြားခွဲထားခြင်းအတွက် အခြားနည်းစနစ်များ-

ဗဟိုခွာအားစက်၏ ကန့်သတ်ချက်များကို ကျော်လွှားရန်အတွက် သုတေသီများသည် နျူကလိယနှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားကို ခွဲထုတ်ရန် အခြားနည်းလမ်းများကို တီထွင်ခဲ့ကြသည်။ ထိုကဲ့သို့သော နည်းလမ်းတစ်ခုမှာ သိပ်သည်းဆ gradient ဗဟိုခွာအားစက်ဖြစ်ပြီး၊ ၎င်းသည် စဉ်ဆက်မပြတ် gradient တစ်ခုဖန်တီးရန် သိပ်သည်းဆ gradient အလတ်စားကို အသုံးပြုသည်။ homogenate ကို gradient ၏ထိပ်တွင် ဂရုတစိုက်အလွှာလိုက်ထားပြီး ဗဟိုခွာအားစက်ဖြင့် ခွဲထုတ်ခြင်းဖြင့်၊ organelles များကို ၎င်းတို့၏ buoyancy အပေါ်အခြေခံ၍ အပိုင်းပိုင်းခွဲနိုင်ပြီး နျူကလိယနှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားကို နှိုင်းယှဉ်နိုင်သော ထိရောက်သော ခွဲထုတ်မှုကို ခွင့်ပြုသည်။ သို့သော်၊ ခွဲထုတ်မှု တိုးတက်လာသော်လည်း၊ ဤနည်းလမ်းသည် အချိန်ပိုကြာနိုင်ပြီး လုပ်ဆောင်ရန် ပိုမိုစိန်ခေါ်မှုရှိသည်။

၅။ အဆင့်မြင့်ချဉ်းကပ်မှုများ- သံလိုက်အစက်အပြောက်များနှင့် ဖလိုရိုဆင့်တဂ်လုပ်ခြင်း-

မကြာသေးမီနှစ်များအတွင်း၊ သံလိုက်အမှုန်အမွှားများနှင့် fluorescent tagging ပါဝင်သော အဆင့်မြင့်နည်းပညာများသည် ဆဲလ်ခွဲထုတ်ခြင်းအတွက် ရေပန်းစားလာခဲ့သည်။ နျူကလိယ သို့မဟုတ် မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားပေါ်တွင်ရှိသော မျက်နှာပြင်ပရိုတိန်းများကို ပစ်မှတ်ထားသော သီးခြားပဋိပစ္စည်းများဖြင့် ဖုံးအုပ်ထားသော သံလိုက်အမှုန်အမွှားများကို organelle တစ်ခုကို အခြား organelle မှ ရွေးချယ်၍ ခွဲထုတ်ရန် အသုံးပြုနိုင်သည်။ ထို့အပြင်၊ နျူကလိယ သို့မဟုတ် မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားကို ပစ်မှတ်ထားသော သီးခြား fluorescent ဆိုးဆေးများကို အသုံးပြုခြင်းဖြင့်၊ organelle များကို အထူးပြု flow cytometers သို့မဟုတ် fluorescence-activated cell sorting (FACS) စက်များကို အသုံးပြု၍ စီစစ်နိုင်သည်။ ဤခေတ်မီနည်းပညာများသည် ဤ organelle များကို ခွဲထုတ်ရာတွင် မကြုံစဖူး တိကျမှုနှင့် ထိရောက်မှုကို ပေးစွမ်းသည်။

နိဂုံးချုပ်:

နျူကလိယနှင့် မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားတို့ကို ခွဲခြားခြင်းသည် ၎င်းတို့၏ သိပ်သည်းဆနှင့် အဆီကြွယ်ဝသော သဘောသဘာဝ အလားတူကြောင့် စိန်ခေါ်မှုတစ်ရပ်ဖြစ်သည်။ ရိုးရာ centrifugation နည်းလမ်းများသည် လုံလောက်သော ခွဲထုတ်မှုရရှိရန် ရုန်းကန်နေရသော်လည်း၊ density gradient centrifugation၊ magnetic bead-based isolation နှင့် fluorescent tagging ကဲ့သို့သော အဆင့်မြင့်နည်းပညာများသည် ဤအတားအဆီးများကို ကျော်လွှားရန် အစွမ်းထက်သောကိရိယာများအဖြစ် ပေါ်ထွက်လာခဲ့သည်။ ဤဆန်းသစ်သောနည်းလမ်းများသည် organelle ခွဲထုတ်မှု၏ ထိရောက်မှုနှင့် တိကျမှုကို တိုးတက်စေရုံသာမက ၎င်းတို့၏ လုပ်ဆောင်ချက်များနှင့် အပြန်အလှန်ဆက်သွယ်မှုများကို ပြည့်စုံသော ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုကိုလည်း ပြုလုပ်နိုင်စေပြီး ဆဲလ်နှင့် မော်လီကျူးသုတေသနအတွက် လမ်းကြောင်းအသစ်များကို ဖွင့်လှစ်ပေးပါသည်။