ihe abụọ organelles a na-apụghị ikewapụ ngwa ngwa site na centrifugation

Nkewa nke Subcellular: Imeri Ihe Ịma Aka nke Kewapụ Nuclei na Mitochondria

Okwu Mmalite:

Centrifugation bụ usoro dị ike e ji eme ihe na bayọlọji sel na molekul iji kewapụ ma kewapụ organelles dị iche iche site na ngwakọta dị iche iche. Usoro a dabere na ụkpụrụ nke sedimentation dị iche iche, ebe organelles dị arọ na-ada n'ala nke tube n'okpuru ike centrifugal. Agbanyeghị, enwere ihe ole na ole dị iche na iwu a, organelles abụọ na-anaghị ekewa ngwa ngwa site na centrifugation bụ nuclei na mitochondria. N'isiokwu a, anyị ga-enyocha ihe ịma aka ndị dị na ikewa organelles abụọ a dị mkpa, mkpa nke ime ka ha dị ọcha na nnwale ụfọdụ, na ụzọ ndị ọzọ iji merie ihe mgbochi a.

1. Mgbagwoju anya nke Nuclei na Mitochondria:

Nkụl, nke a na-akpọkarị ebe iwu nke mkpụrụ ndụ, bụ ndị na-ahụ maka idobe ihe mkpụrụ ndụ ihe nketa na ịchịkwa ngosipụta mkpụrụ ndụ ihe nketa. N'aka nke ọzọ, Mitochondria bụ ike dị mkpa nke na-emepụta ike n'ụdị adenosine triphosphate (ATP). N'ihi ọrụ dị iche iche ha na njirimara nhazi pụrụ iche ha, ikewapụ organelles abụọ a nwere ike ibute nnukwu nsogbu.

2. Mkpa nke ime ka mmadụ dị ọcha:

Ọ bụ ezie na ọ ga-adị mma ka e sachaa akụkụ ahụ dị iche iche maka nnwale ụfọdụ, e nwere ebe ime ka nuclei na mitochondria dị n'otu bụ ihe kachasị mkpa. Dịka ọmụmaatụ, mgbe a na-amụ banyere nhazi nke mkpụrụ ndụ ihe nketa iji zaa mgbanwe na metabolism mitochondrial, ọ dị oke mkpa inyocha mmetụta nke nsogbu mitochondrial na ngosipụta mkpụrụ ndụ ihe nketa nuklia. N'ọnọdụ ndị dị otú ahụ, nkewa nke nuclei na mitochondria ga-eduga na nyocha na-ezughị ezu na nkọwa na-ezighi ezi.

3. Mmachi nke Centrifugation nkịtị:

Usoro nhazi centrifugation ọdịnala na-eji centrifugation dị iche iche, nke gụnyere usoro nhazi centrifugation na ọsọ dị iche iche iji kewaa organelles site na nha na njupụta. N'ụzọ dị mwute, nuclei na mitochondria nwere njupụta na-ejikọta ọnụ na ihe ndị yiri ya nke sedimentation, na-eme ka ọ fọrọ nke nta ka ọ ghara ikwe omume ikewapụ ha site na iji ụzọ a naanị. Nke a bụ isi n'ihi oke ọdịnaya lipid dị na organelles abụọ ahụ, na-eduga na ha yiri nke ahụ ma na-ebute njikọta sedimentation n'oge centrifugation.

4. Usoro Ndị Ọzọ Maka Ịwapụ Onwe:

Iji merie oke nke centrifugation, ndị nchọpụta emepụtala usoro ọzọ maka nkewa nke nuclei na mitochondria. Otu n'ime ụzọ dị otu a bụ centrifugation nke njupụta gradient, nke na-eji usoro njupụta gradient emepụta gradient na-aga n'ihu. Site n'iji nlezianya kpuchie homogenate n'elu gradient na centrifuging ya, enwere ike kewaa organelles dabere na mmụba ha, na-enye ohere ka nkewa nke nuclei na mitochondria dị irè. Agbanyeghị, n'agbanyeghị nkewa ka mma, usoro a nwere ike were ogologo oge ma sie ike karịa ịrụ ọrụ.

5. Ụzọ Ndị Dị Elu: Magnetic Beads na Fluorescent Tagging:

N'afọ ndị na-adịbeghị anya, usoro dị elu gụnyere magnetik beads na fluorescent tagging abụrụla ihe a ma ama maka nkewa nke subcellular. Enwere ike iji magnetik beads ekpuchiri ihe mgbochi pụrụ iche nke na-elekwasị anya na protein dị na nuclei ma ọ bụ mitochondria iji kewapụ otu organelle site na nke ọzọ. Ọzọkwa, site na iji agba fluorescent kpọmkwem nke lekwasịrị anya na nuclei ma ọ bụ mitochondria, enwere ike ịhazi organelles site na iji specialized flow cytometers ma ọ bụ igwe fluorescence-activated cell sorting (FACS). Teknụzụ ndị a dị elu na-enye izi ezi na arụmọrụ a na-ahụtụbeghị mbụ na mwepụ nke organelles ndị a.

Mmechi:

Ikewapụta nuclei na mitochondria bụ ihe ịma aka n'ihi njupụta ha yiri nke ahụ na ọdịdị ha bara ụba na lipid. Ọ bụ ezie na usoro centrifugation ọdịnala na-esiri ike inweta nkewa zuru oke, usoro ndị dị elu dịka centrifugation gradient njupụta, ichebe magnetik bead, na tagging fluorescent apụtala dị ka ngwaọrụ dị ike maka imeri ihe mgbochi ndị a. Usoro ọhụrụ ndị a abụghị naanị ime ka arụmọrụ na izi ezi nke nkewa organelle dịkwuo mma kamakwa ọ na-enye ohere inyocha ọrụ na mmekọrịta ha nke ọma, na-emepe ụzọ ọhụrụ maka nyocha cellular na molekul.