ဗဟိုခွာစနစ်က ဆဲလ်အော်ဂဲနယ်တွေကို ဘယ်လိုခွဲထုတ်သလဲ။
မိတ်ဆက်:
ဇီဝဗေဒဆိုင်ရာ သုတေသနတွင် ဆဲလ်ကိုယ်တွင်းအင်္ဂါများကို ၎င်းတို့၏ အရွယ်အစား၊ သိပ်သည်းဆနှင့် အနည်ထိုင်နှုန်းအပေါ် အခြေခံ၍ ခွဲခြားရန် အသုံးပြုသည့် အရေးကြီးသော နည်းပညာတစ်ခုဖြစ်သည်။ နမူနာများကို မြန်နှုန်းမြင့်လည်ပတ်အားများဖြင့် ခွဲထုတ်ခြင်းဖြင့်၊ ဗဟိုခွာစနစ်သည် ဤဂုဏ်သတ္တိများရှိ ကွာခြားချက်များကို အသုံးချပြီး သိပ္ပံပညာရှင်များအား နောက်ထပ်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုအတွက် သီးခြားကိုယ်တွင်းအင်္ဂါများကို ခွဲထုတ်နိုင်စေပါသည်။ ဤဆောင်းပါးသည် ဗဟိုခွာစနစ်၏နောက်ကွယ်ရှိ အခြေခံမူများကို ရှင်းပြပြီး ဆဲလ်ဇီဝဗေဒတွင် ၎င်း၏အသုံးချမှုများကို စူးစမ်းလေ့လာသည်။
၁။ ဗဟိုခွာစက်လည်ပတ်မှု၏ အခြေခံများ-
ဗဟိုခွာခြင်းတွင် နမူနာများကို မြင့်မားသောအမြန်နှုန်းဖြင့် လှည့်ပတ်ပြီး ဗဟိုခွာအားများထုတ်ပေးသည့် စက်တစ်ခုဖြစ်သည့် ဗဟိုခွာကို အသုံးပြုခြင်းပါဝင်သည်။ ဤအားများသည် အမှုန်များကို အနည်အနှစ်ဖြစ်စေပြီး ပိုလေးပြီး ပိုကြီးသော အမှုန်များသည် ပိုပေါ့ပါးပြီး ပိုသေးငယ်သော အမှုန်များထက် ပိုမိုမြန်ဆန်စွာ စုပုံကြသည်။ ပြွန်အောက်ခြေရှိ ပိုလေးသော အမှုန်များကို အလုံးလိုက် ကြိတ်ခွဲခြင်းဖြင့် ခွဲထုတ်ပြီး နမူနာ၏ ကျန်အပိုင်းမှ ၎င်းတို့ကို ခွဲထုတ်ခြင်းဖြင့် ခွဲထုတ်သည်။
၂။ ဒစ်ဖရန်ရှယ် ဆင့်ထရီဖူဂင့်
ဆဲလ်အော်ဂဲနစ်များကို ခွဲထုတ်ရန် အသုံးအများဆုံး နည်းပညာမှာ ဒစ်ဖாရယ်ရှယ် စင်ထရီဖူရှင်း ဖြစ်သည်။ ၎င်းတွင် ဆင့်ကဲဆင့်ကဲ စင်ထရီဖူရှင်း အဆင့်များ ပါဝင်ပြီး တစ်ခုချင်းစီတွင် ဗဟိုခွာအားနှင့် ကြာချိန် တိုးလာသည်။ ရည်မှန်းချက်မှာ အော်ဂဲနစ်များကို ၎င်းတို့၏ အရွယ်အစားနှင့် သိပ်သည်းဆအပေါ် အခြေခံ၍ တဖြည်းဖြည်း ခွဲထုတ်ရန် ဖြစ်သည်။
ပထမဆုံး အမြန်နှုန်းနိမ့် လည်ပတ်မှုအတွင်း၊ ကြီးမားသော အပျက်အစီးများနှင့် နျူကလိယများသည် အောက်ခြေတွင် စုပုံလာပြီး အလုံးလေးများ ဖွဲ့စည်းသည်။ မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားနှင့် လိုင်ဆိုဆုမ်းကဲ့သို့သော သေးငယ်သော အင်္ဂါအစိတ်အပိုင်းများပါ၀င်သည့် supernatant ကို စုဆောင်းပြီး ပိုမိုမြင့်မားသော အမြန်နှုန်းဖြင့် နောက်ထပ် centrifugation တစ်ခု ပြုလုပ်သည်။ ဤလုပ်ငန်းစဉ်ကို အကြိမ်ပေါင်းများစွာ ထပ်ခါတလဲလဲ ပြုလုပ်ပြီး သီးခြား အင်္ဂါအစိတ်အပိုင်းများကို ခွဲထုတ်သည်။
၃။ သိပ်သည်းဆ ချိန်ညှိခြင်း ဗဟိုခွာခြင်း-
သိပ်သည်းဆ gradient centrifugation သည် အရွယ်အစားအားဖြင့်သာမက သိပ်သည်းဆဖြင့်ပါ organelles များကို ခွဲခြားပေးသည့် ပိုမိုသန့်စင်သော နည်းပညာတစ်ခုဖြစ်သည်။ ဤနည်းလမ်းတွင်၊ သိပ်သည်းဆများ မြင့်တက်လာသော အရည်အဆင့် နှစ်ခု သို့မဟုတ် နှစ်ခုထက်ပိုသော အရည်အဆင့်များကို centrifuge ပြွန်တစ်ခုတွင် အလွှာလိုက် ခွဲထားသည်။ centrifuge လုပ်သောအခါ၊ organelles များသည် ၎င်းတို့၏ သိပ်သည်းဆသည် ပတ်ဝန်းကျင်ကြားခံနှင့် ကိုက်ညီသော ဒေသသို့ ရောက်ရှိသည်အထိ သိပ်သည်းဆ gradient မှတစ်ဆင့် ရွှေ့ပြောင်းသွားလာသည်။
အင်္ဂါအစိတ်အပိုင်းများသည် gradient အတွင်း ကွဲပြားသော band များ သို့မဟုတ် zone များကို ဖွဲ့စည်းပေးပြီး ၎င်းတို့၏ စုဆောင်းမှုနှင့် နောက်ထပ် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုများကို ခွင့်ပြုသည်။ ဤနည်းပညာသည် အရွယ်အစားတူသော်လည်း သိပ်သည်းဆများ မတူညီသော peroxisomes နှင့် Golgi apparatus ကဲ့သို့သော နူးညံ့သိမ်မွေ့သော အင်္ဂါအစိတ်အပိုင်းများကို ခွဲထုတ်ရာတွင် အထူးအသုံးဝင်ပါသည်။
၄။ အလွန်ဗဟိုခွာစက်ဖြင့် လှည့်ပတ်ခြင်း-
Ultracentrifugation တွင် ကမ္ဘာမြေဆွဲအားထက် အဆ ၁၀၀,၀၀၀ ထက်ပိုသော အားများထုတ်လုပ်နိုင်သည့် မြန်နှုန်းမြင့် centrifuges များပါဝင်သည်။ ဤနည်းပညာကို မိုက်ခရိုဆုမ်းများ၊ ရိုင်ဗိုဆုမ်းများနှင့် ဗိုင်းရပ်စ်များကဲ့သို့သော သေးငယ်ပြီး သိပ်သည်းသော အော်ဂဲနစ်များကို ခွဲထုတ်ရန်အတွက် အသုံးပြုသည်။
နမူနာကို ထိုကဲ့သို့သော အစွန်းရောက်အားများ ပေးခြင်းဖြင့်၊ ultracentrifugation သည် အမှုန်များကို နာနိုစကေးအထိ ခွဲထုတ်နိုင်သည်။ ရရှိလာသော အနည်ထိုင်မှုပုံစံများကို ၎င်းတို့၏ အရွယ်အစားနှင့် သိပ်သည်းဆအပေါ်အခြေခံ၍ သီးခြားဆဲလ်အစိတ်အပိုင်းများကို ခွဲထုတ်ရန် အသုံးပြုသည်။
၅။ ဆဲလ်ဇီဝဗေဒတွင် အသုံးချမှုများ-
ဗဟိုခွာစက်လည်ပတ်ခြင်းသည် အသုံးချမှုအမျိုးမျိုးရှိသော ဆဲလ်ဇီဝဗေဒတွင် မရှိမဖြစ်ကိရိယာတစ်ခုဖြစ်သည်။ သတ်မှတ်ထားသော အင်္ဂါအစိတ်အပိုင်းများကို သီးခြားခွဲထုတ်သန့်စင်ခြင်းဖြင့် သုတေသီများသည် ၎င်းတို့၏လုပ်ဆောင်ချက်များ၊ ပရိုတင်းဖွဲ့စည်းမှုနှင့် ဆဲလ်အတွင်းရှိ အပြန်အလှန်ဆက်သွယ်မှုများကို လေ့လာနိုင်သည်။
သိသာထင်ရှားသော အသုံးချမှုတစ်ခုမှာ မိုက်တိုခွန်ဒရီးယား လုပ်ဆောင်ချက်နှင့် ချို့ယွင်းမှုကို နားလည်ခြင်းဖြစ်သည်။ ဗဟိုခွာစနစ်ဖြင့် လည်ပတ်ခြင်းဖြင့် သုတေသီများသည် မိုက်တိုခွန်ဒရီးယားကို မတူညီသော တစ်ရှူးများ သို့မဟုတ် ဆဲလ်များမှ ခွဲထုတ်နိုင်ပြီး ၎င်းတို့၏ ဇီဝစွမ်းအင်၊ ဇီဝဖြစ်စဉ်နှင့် ပါကင်ဆန် သို့မဟုတ် အယ်လ်ဇိုင်းမားကဲ့သို့သော ရောဂါများတွင် အခန်းကဏ္ဍကို စစ်ဆေးနိုင်စေပါသည်။
နောက်ထပ်အသုံးချမှုတစ်ခုမှာ ဗိုင်းရပ်စ်များနှင့် ဗိုင်းရပ်စ်ကူးစက်မှုများကို လေ့လာခြင်းတွင် တည်ရှိသည်။ Ultracentrifugation သည် ကူးစက်ခံရသောဆဲလ်များမှ ဗိုင်းရပ်စ်အမှုန်အမွှားများကို သန့်စင်စေပြီး ၎င်းတို့၏ဖွဲ့စည်းပုံ၊ မျိုးရိုးဗီဇနှင့် ဗိုင်းရပ်စ်ပွားများခြင်း၏ ယန္တရားများကို လက္ခဏာရပ်ဖော်ပြရာတွင် အထောက်အကူပြုသည်။
ထို့အပြင်၊ ဗဟိုခွာစနစ်သည် ပရိုတင်းပေါင်းစပ်မှုနှင့် ကုန်ကူးမှုတွင်ပါဝင်သော ဆဲလ်အခန်းများကို သီးခြားခွဲထုတ်ခြင်းဖြင့် ပရိုတီယိုမစ်စ်နယ်ပယ်တွင် အရေးပါသောအခန်းကဏ္ဍမှ ပါဝင်သည်။ ၎င်းသည် ပရိုတင်းဒေသအလိုက်ပြောင်းလဲမှု၊ ဘာသာပြန်ပြီးနောက်ပြုပြင်မွမ်းမံမှုများနှင့် ပရိုတင်း-ပရိုတင်း အပြန်အလှန် ဆက်သွယ်မှုတို့ကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာရာတွင် လွယ်ကူချောမွေ့စေသည်။
နိဂုံးချုပ်:
ဆဲလ်ကိုယ်တွင်းအင်္ဂါများကို ၎င်းတို့၏ အရွယ်အစား၊ သိပ်သည်းဆနှင့် အနည်ထိုင်နှုန်းတို့အပေါ် အခြေခံ၍ ခွဲထုတ်ရန်အတွက် ဗဟိုခွာခြင်းသည် မရှိမဖြစ်လိုအပ်သော နည်းပညာတစ်ခုဖြစ်သည်။ ကွဲပြားသော ဗဟိုခွာခြင်းနှင့် သိပ်သည်းဆ gradient ဗဟိုခွာခြင်း နှစ်မျိုးလုံးကို အသုံးပြုခြင်းဖြင့် သီးခြားကိုယ်တွင်းအင်္ဂါများကို ခွဲထုတ်ပြီး နက်နက်ရှိုင်းရှိုင်း လေ့လာနိုင်သည်။ ဆဲလ်ဇီဝဗေဒတွင် ဤနည်းပညာ၏ ကျယ်ပြန့်သော အသုံးချမှုများသည် ဆဲလ်လုပ်ငန်းစဉ်များနှင့် ကုထုံးများ ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုအပေါ် ကျွန်ုပ်တို့၏ နားလည်မှုတွင် သိသိသာသာ အထောက်အကူပြုသည်။
။