centrifuge က ပရိုတင်းတွေကို lipid တွေနဲ့ ခွဲထုတ်နိုင်ပါသလား။
မိတ်ဆက်: ပရိုတင်း-လစ်ပစ် ခွဲထုတ်ခြင်းတွင် ဗဟိုခွာခြင်း၏ အခန်းကဏ္ဍကို နားလည်ခြင်း
ဗဟိုခွာစက်သည် ဇီဝဓာတုဗေဒနှင့် မော်လီကျူးဇီဝဗေဒ အပါအဝင် သိပ္ပံနယ်ပယ်အမျိုးမျိုးတွင် ၎င်းတို့၏ သိပ်သည်းဆအပေါ် အခြေခံ၍ အရာများကို ခွဲထုတ်ရန်အတွက် အသုံးပြုသည့် အခြေခံနည်းစနစ်တစ်ခုဖြစ်သည်။ ပရိုတင်းများကို လစ်ပစ်များမှ ခွဲထုတ်ရာတွင် ဗဟိုခွာစက်သည် အစွမ်းထက်သောကိရိယာတစ်ခု ဖြစ်နိုင်သည်။ ဤဆောင်းပါးသည် ဗဟိုခွာစက်ကို အသုံးပြု၍ ပရိုတင်း-လစ်ပစ် ခွဲထုတ်ခြင်း၏ ရှုပ်ထွေးမှုများကို လေ့လာပြီး ၎င်း၏အသုံးချမှုများနှင့် စိန်ခေါ်မှုများကို မီးမောင်းထိုးပြထားသည်။ နယ်ပယ်များစွာတွင် သုတေသနကို တော်လှန်ပြောင်းလဲနိုင်သည့် အလားအလာဖြင့် ဤနည်းစနစ်၏ စွမ်းရည်များနှင့် ကန့်သတ်ချက်များကို နားလည်ခြင်းသည် အရေးကြီးလာသည်။
I. ဗဟိုခွာခြင်းအခြေခံများ- ခွဲထွက်ခြင်းနောက်ကွယ်ရှိ အားများကို ဖော်ထုတ်ခြင်း
ဗဟိုခွာအားကို အသုံးပြု၍ နမူနာအတွင်းရှိ မတူညီသော အစိတ်အပိုင်းများကို ၎င်းတို့၏ ဒြပ်ထု သို့မဟုတ် သိပ်သည်းဆအပေါ် အခြေခံ၍ ခွဲထုတ်သည်။ ဗဟိုခွာအား၏ အခြေခံမူက ပိုသိပ်သည်းသော အမှုန်များသည် ပိုပေါ့ပါးသော အမှုန်များထက် ပိုမြန်သောနှုန်းဖြင့် ပြွန်၏အောက်ခြေသို့ စုပုံလာလိမ့်မည်ဟု ဖော်ပြထားသည်။ သို့သော် ပရိုတင်းများကို လစ်ပစ်များမှ ခွဲထုတ်ခြင်းသည် ၎င်းတို့၏ သိပ်သည်းဆဆင်တူမှုကြောင့် ရှုပ်ထွေးသော အလုပ်တစ်ခု ဖြစ်နိုင်သည်။ အောင်မြင်စွာ ခွဲထုတ်နိုင်ရန်အတွက် အရွယ်အစား၊ ပုံသဏ္ဍာန်နှင့် ပျော်ဝင်နိုင်မှုကဲ့သို့သော အခြားအချက်များကို ထည့်သွင်းစဉ်းစားရန် လိုအပ်ပါသည်။
II. ဒစ်ဖရန်ရှယ် ဆင့်ထရီဖူရှင်း- သိပ်သည်းဆနှင့် အရွယ်အစား ကွာခြားချက်များကို ထိန်းချုပ်ခြင်း
ပရိုတင်းများနှင့် လစ်ပစ်များကို ခွဲထုတ်ရန် ကျယ်ပြန့်စွာအသုံးပြုသော နည်းလမ်းတစ်ခုမှာ ကွဲပြားသော ဗဟိုခွာအားစက်ဖြင့် ခွဲထုတ်ခြင်း ဖြစ်သည်။ ၎င်းသည် အစိတ်အပိုင်းများအကြား သိပ်သည်းဆနှင့် အရွယ်အစား ကွဲပြားမှုများကို အခွင့်ကောင်းယူသည်။ အစပိုင်းတွင်၊ ဆဲလ်တစ်ခုလုံး သို့မဟုတ် တစ်ရှူး homogenates များကို ပိုကြီးသော အပျက်အစီးများနှင့် nuclei များမှ ခွဲထုတ်ရန် အနိမ့်ဆုံးအမြန်နှုန်း ဗဟိုခွာအားစက်ဖြင့် ခွဲထုတ်ခြင်းအဆင့်ကို လုပ်ဆောင်သည်။ ၎င်းနောက် မိုက်တိုခွန်ဒရီးယား သို့မဟုတ် endoplasmic reticulum ကဲ့သို့သော organelles များနှင့် subcellular အစိတ်အပိုင်းများကို ခွဲထုတ်နိုင်စေသည့် မြန်နှုန်းမြင့် ဗဟိုခွာအားစက်ဖြင့် အဆက်မပြတ် ခွဲထုတ်သည်။
III။ သိပ်သည်းဆ ချိန်ညှိခြင်း- ထိရောက်မှုနှင့် ရှုပ်ထွေးမှုကြားရှိ ပါးလွှာသော မျဉ်းကြောင်းတစ်ခု
သိပ်သည်းဆ gradient centrifugation သည် ပရိုတင်း-လစ်ပစ် ခွဲထုတ်ရန်အတွက် အသုံးပြုသော နောက်ထပ်နည်းပညာတစ်ခုဖြစ်သည်။ ဤနည်းလမ်းတွင်၊ နမူနာများကို centrifuge ပြွန်တစ်ခုရှိ sucrose သို့မဟုတ် cesium chloride ကဲ့သို့သော သိပ်သည်းဆ gradient medium ပေါ်တွင် အလွှာလိုက် ထားရှိသည်။ နမူနာသည် centrifuge လုပ်နေစဉ်တွင်၊ အရာဝတ္ထုများသည် gradient မှတစ်ဆင့် ရွေ့လျားပြီး ၎င်းတို့၏ ပေါလောမျောနေသော သိပ်သည်းဆအပေါ်အခြေခံ၍ ခွဲထုတ်သည်။ ဤနည်းလမ်းသည် ပရိုတင်းနှင့် လစ်ပစ် နှစ်မျိုးလုံးပါဝင်သော lipoproteins ကဲ့သို့သော နူးညံ့သိမ်မွေ့သောဖွဲ့စည်းပုံများကို ခွဲထုတ်နိုင်စေပါသည်။
IV. ပရိုတင်း-လစ်ပစ် ခွဲထုတ်ခြင်းဆိုင်ရာ စိန်ခေါ်မှုများ- ကပ်စေးနေသော အခြေအနေကို ကျော်လွှားခြင်း
ပရိုတင်းများနှင့် လစ်ပစ်များကို ခွဲထုတ်ရာတွင် မွေးရာပါ အခက်အခဲများထဲမှ တစ်ခုမှာ ၎င်းတို့၏ ဆက်စပ်မှုတွင် တည်ရှိသည်။ ပရိုတင်းများနှင့် လစ်ပစ်များသည် မကြာခဏ ဓါတ်ပြုပြီး ရှုပ်ထွေးမှုများ ဖွဲ့စည်းလေ့ရှိသောကြောင့် ဗဟိုခွာစက်ဖြင့်သာ ခွဲထုတ်ရန် ခက်ခဲစေသည်။ ဤစိန်ခေါ်မှုကို ဖြေရှင်းရန်အတွက် ပရိုတင်း-လစ်ပစ် အပြန်အလှန် ဆက်သွယ်မှုများကို အနှောင့်အယှက်ပေးရန် ညင်သာသော ဆပ်ပြာများ သို့မဟုတ် အော်ဂဲနစ် ပျော်ရည်ကုသမှုများကို အသုံးပြုနိုင်သည်။ သို့သော် ခွဲထုတ်ခြင်းကို လွယ်ကူချောမွေ့စေစဉ် နမူနာ၏ သမာဓိကို ထိန်းသိမ်းပေးသည့် အကောင်းဆုံးအခြေအနေများကို ရှာဖွေခြင်းသည် စမ်းသပ်ပြီး အမှားအယွင်း လုပ်ငန်းစဉ်တစ်ခုအဖြစ် ရှိနေဆဲဖြစ်သည်။
V. အဆင့်မြင့် ဗဟိုခွာခြင်းနည်းစနစ်များ- စံနည်းလမ်းများထက် ကျော်လွန်၍
သုတေသီများသည် ပရိုတင်း-လစ်ပစ် ခွဲထုတ်မှု စွမ်းဆောင်ရည်ကို မြှင့်တင်ရန်အတွက် အဆင့်မြင့် centrifugation နည်းစနစ်များကို စဉ်ဆက်မပြတ် တီထွင်နေကြသည်။ ထိုကဲ့သို့သော နည်းစနစ်တစ်ခုမှာ zonal သို့မဟုတ် isopycnic centrifugation ဖြစ်ပြီး၊ ၎င်းသည် မတူညီသော သိပ်သည်းဆရှိသော မော်လီကျူးများကို ခွဲထုတ်ရန် အလွှာများစွာပါသော သိပ်သည်းဆ gradient များကို အသုံးပြုသည်။ ဤနည်းလမ်းသည် တိကျသော fractionation ကို ခွင့်ပြုသော်လည်း ထိရောက်စွာ လုပ်ဆောင်ရန် အထူးပြု ပစ္စည်းကိရိယာများနှင့် ကျွမ်းကျင်မှု လိုအပ်ပါသည်။ ထို့အပြင်၊ ultracentrifugation နှင့် super-speed centrifugation ကဲ့သို့သော ဆန်းသစ်သော နည်းပညာများသည် ပိုမိုရှုပ်ထွေးသော ခွဲထုတ်မှု အခြေအနေများကိုပင် ကိုင်တွယ်ဖြေရှင်းရန် ဆန်းသစ်သော ချဉ်းကပ်မှုများကို ပေးစွမ်းနိုင်သည်။
VI. အသုံးချမှုများ- ဆဲလ်ယန္တရားများနှင့် ရောဂါလမ်းကြောင်းများကို ဖော်ထုတ်ခြင်း
ဗဟိုခွာအားကို အသုံးပြု၍ ပရိုတင်း-လစ်ပစ် ခွဲထုတ်ခြင်းသည် သုတေသနနယ်ပယ်အမျိုးမျိုးတွင် သိသာထင်ရှားသော သက်ရောက်မှုများရှိသည်။ ဥပမာအားဖြင့်၊ ဆဲလ်အမြှေးပါးများအတွင်းရှိ လစ်ပစ်များနှင့် ပရိုတင်းများ မည်သို့ အပြန်အလှန် သက်ရောက်မှုရှိသည်ကို နားလည်ခြင်းသည် ဆဲလ်အချက်ပြမှု လွှဲပြောင်းခြင်းနှင့် ရောဂါလမ်းကြောင်းများအကြောင်း အရေးကြီးသော ထိုးထွင်းသိမြင်မှုများကို ဖော်ထုတ်ပေးသည်။ သတ်မှတ်ထားသော ပရိုတင်းများ သို့မဟုတ် လစ်ပစ်များကို သီးခြားခွဲထုတ်ခြင်းဖြင့် သိပ္ပံပညာရှင်များသည် ပရိုတင်းခေါက်ခြင်း၊ ဆဲလ်ရွှေ့ပြောင်းခြင်းနှင့် ဆဲလ်ကွဲခြင်းကဲ့သို့သော ဇီဝကမ္မဖြစ်စဉ်များတွင် ၎င်းတို့၏ အခန်းကဏ္ဍများကို ဖော်ထုတ်နိုင်သည်။
နိဂုံးချုပ်- ပရိုတင်း-လစ်ပစ် သုတေသနတွင် အစွမ်းထက်သော နည်းပညာတစ်ခု
ဗဟိုခွာစနစ်သည် ပရိုတင်းများကို လစ်ပစ်များနှင့် ခွဲထုတ်ရန်အတွက် စွယ်စုံသုံးကိရိယာတစ်ခုဖြစ်သော်လည်း ၎င်းတို့၏ သိပ်သည်းဆနှင့် အပြန်အလှန် ဆက်သွယ်မှုများကြောင့် စိန်ခေါ်မှုများရှိသည်။ ကွဲပြားသော ဗဟိုခွာစနစ်နှင့် သိပ်သည်းဆ gradient ဗဟိုခွာစနစ်ကဲ့သို့သော ဗဟိုခွာစနစ်အမျိုးမျိုးကို အသုံးပြုခြင်းဖြင့် သုတေသီများသည် ရှုပ်ထွေးသော နမူနာများမှ ပရိုတင်းများနှင့် လစ်ပစ်များကို ထိရောက်စွာ ခွဲထုတ်ပြီး ခွဲထုတ်နိုင်သည်။ ဗဟိုခွာစနစ်တွင် စဉ်ဆက်မပြတ်တိုးတက်မှုများသည် ပိုမိုတိကျပြီး အစွမ်းထက်သော ပရိုတင်း-လစ်ပစ် ခွဲထုတ်နည်းလမ်းများအတွက် လမ်းခင်းပေးခဲ့ပြီး ဆဲလ်ယန္တရားများနှင့် ရောဂါလမ်းကြောင်းများကို ရှာဖွေတွေ့ရှိနိုင်စေပါသည်။
။