Afaka manasaraka ny proteinina amin'ny lipida ve ny centrifuge?

Fampidirana: Fahatakarana ny anjara asan'ny centrifugation amin'ny fisarahana proteinina-lipida

Teknika fototra ampiasaina amin'ny sehatra siantifika isan-karazany ny "centrifugation", anisan'izany ny biokimia sy ny biolojia molekiola, mba hanasarahana ireo akora mifototra amin'ny hakitroky ny akora. Raha ny momba ny fanasarahana ny proteinina amin'ny lipida, dia mety ho fitaovana mahery vaika ny "centrifugation". Ity lahatsoratra ity dia mandinika ny fahasarotan'ny fanasarahana ny proteinina-lipida amin'ny fampiasana "centrifuge" ary manasongadina ny fampiharana azy sy ny fanamby atrehiny. Miaraka amin'ny fahafahana manova tanteraka ny fikarohana amin'ny sehatra maro, dia zava-dehibe ny fahatakarana ny fahaiza-manao sy ny fetran'ity teknika ity.

I. Fototry ny "Cenrifugation": Famoahana ireo hery ao ambadiky ny fisarahana

Mampiasa hery miendrika santionany ny "centrifugation" mba hanasarahana ireo singa samihafa ao anatin'ny santionany mifototra amin'ny lanjany na ny hakitroky ny singa. Ny fitsipiky ny hery miendrika santionany dia milaza fa ireo singa matevina kokoa dia hiangona haingana kokoa mankany amin'ny faran'ny fantsona noho ireo singa maivana kokoa. Na izany aza, ny fanasarahana ny proteinina amin'ny lipida dia mety ho asa sarotra noho ny hakitroky mitovy amin'izy ireo. Mba hahazoana fanasarahana mahomby dia mila dinihina ireo anton-javatra hafa toy ny habeny, ny endriny ary ny fahafahany levona.

II. Fampidirana amin'ny alalan'ny "Cenrifugation" samihafa: Fampiasana ny fahasamihafan'ny hakitroky sy ny habe

Fomba iray ampiasaina betsaka hanasarahana ny proteinina amin'ny lipida ny "differential centrifugation". Manararaotra ny fiovaovan'ny hakitroky sy ny habeny eo amin'ireo singa izy io. Voalohany, dia atao ny dingana "centrifugation" miadana mba hanasarahana ny sela manontolo na ny sela homogenate amin'ny poti-javatra sy ny nokleary lehibe kokoa. Arahin'ny "centrifugation" haingam-pandeha mifanesy izany, izay ahafahana manasaraka ireo organelles sy singa ao anaty sela, toy ny mitochondria na ny reticulum endoplasmika.

III. Fampidirana amin'ny alalan'ny "Desity Gradient Centrifugation": Tsipika manify eo anelanelan'ny fahombiazana sy ny fahasarotana

Teknika iray hafa ampiasaina amin'ny fanasarahana ny proteinina sy ny lipida ny "density gradient centrifugation". Amin'ity fomba fiasa ity, ny santionany dia apetraka eo ambonin'ny "density gradient medium", toy ny sucrose na cesium chloride, ao anaty fantsona "centrifuge". Rehefa mandalo "centrifugation" ny santionany, dia mandalo ny gradient ireo akora, ka misaraka mifototra amin'ny hakitroky ny "sumougant". Ity fomba ity dia ahafahana manasaraka ireo rafitra marefo, toy ny lipoproteins, izay ahitana proteinina sy lipida.

IV. Ireo fanamby amin'ny fisarahana proteinina-lipida: Fandresena ny toe-javatra sarotra

Ny iray amin'ireo olana atrehina amin'ny fanasarahana ny proteinina amin'ny lipida dia ny fifandraisan'izy ireo. Matetika ny proteinina sy ny lipida dia mifandray ary mamorona fitambarana, ka mahatonga azy ireo ho sarotra ny manasaraka azy ireo amin'ny alàlan'ny centrifugation fotsiny. Mba handaminana izany olana izany, dia azo ampiasaina ny savony malefaka na ny fitsaboana solvent organika mba hanakorontanana ny fifandraisan'ny proteinina sy ny lipida. Na izany aza, ny fitadiavana ny fepetra tsara indrindra izay mitazona ny fahamarinan'ny santionany sady manamora ny fanasarahana dia mbola dingana fitsapana sy fahadisoana.

V. Teknika Fampidirana Avo lenta: Mihoatra ny Fomba Mahazatra

Ireo mpikaroka dia tsy mitsahatra mampivelatra teknika "centrifugation" mandroso mba hanatsarana ny fahombiazan'ny fanasarahana proteinina-lipida. Ny iray amin'ireo teknika ireo dia ny "centrifugation zonal" na "isopycnic", izay mampiasa "density gradients" misy sosona maro mba hanasarahana ireo molekiola manana hakitroky samihafa. Ity fomba ity dia ahafahana manao "fragmentation" mazava tsara saingy mitaky fitaovana sy fahaizana manokana mba hahomby. Fanampin'izany, ireo teknika vao misondrotra toy ny "ultracentrifugation" sy ny "super-speed centrifugation" dia mety hanolotra fomba fiasa vaovao hiatrehana ireo toe-javatra fanasarahana sarotra kokoa.

VI. Fampiharana: Famoahana ny fomba fiasan'ny sela sy ny lalan'ny aretina

Ny fanasarahana ny proteinina sy ny lipida amin'ny alalan'ny centrifugation dia misy fiantraikany lehibe amin'ny sehatry ny fikarohana isan-karazany. Ohatra, ny fahatakarana ny fomba ifandraisan'ny proteinina amin'ny lipida ao anatin'ny fonon'ny sela dia mampiharihary fahatakarana manan-danja momba ny fifindran'ny famantarana amin'ny sela sy ny lalan'ny aretina. Amin'ny alàlan'ny fanasarahana ireo proteinina na lipida manokana, dia afaka mamaha ny anjara asan'izy ireo amin'ny dingana ara-batana toy ny fivalozana proteinina, ny fifindran'ny sela, ary ny fizarazarana sela ny mpahay siansa.

Fehiny: Teknika mahery vaika amin'ny fikarohana momba ny proteinina-lipida

Fitaovana azo ampiasaina amin'ny fomba maro samihafa ny "centrifugation" mba hanasarahana ny proteinina amin'ny lipida, na dia miteraka olana aza izany noho ny fitoviana eo amin'ny hakitroky sy ny fifandraisany. Amin'ny fampiasana teknika "centrifugation" isan-karazany toy ny "differential centrifugation" sy ny "density gradient centrifugation", dia afaka manasaraka sy manasaraka tsara ny proteinina sy ny lipida amin'ny santionany sarotra ny mpikaroka. Ny fandrosoana mitohy eo amin'ny teknolojia "centrifugation" dia manokatra lalana ho an'ny fomba fanasarahana proteinina-lipida marina kokoa sy mahery vaika kokoa, ka ahafahana mahita ny fomba fiasan'ny sela sy ny lalan'ny aretina.