Inona avy ireo fetran'ny fractionation sy ny fisarahana amin'ny alalan'ny centrifugation?

Inona avy ireo fetran'ny fractionation sy ny fisarahana amin'ny alàlan'ny centrifugation?

Fampidirana:

Teknika ampiasaina betsaka ao amin'ny laboratoara ny "Cenrifugation" mba hanasarahana sy hanaparitahana ireo singa samihafa ao anaty fangaro mifototra amin'ny hakitroky ny fangarony amin'ny alàlan'ny fitsipiky ny sedimentation. Tafiditra amin'izany ny fihodinan'ny santionany haingana amin'ny hafainganam-pandeha avo lenta, izay mamela ireo singa na singa matevina kokoa hipetraka eo ambany raha toa kosa ireo singa maivana kokoa mijanona eo an-tampony. Na dia fitaovana mahery vaika aza ny "Cenrifugation", dia manana ny fetrany ihany koa izy. Ato amin'ity lahatsoratra ity, dia hojerentsika ny fetran'ny "Cenrifugation" sy ny fanasarahana amin'ny alàlan'ny "Cenrifugation", ary hanasongadina ireo fanamby lehibe atrehin'ireo mpikaroka rehefa mampiasa ity teknika ity.

1. Haben'ny poti sy ny hakitroky ny poti:

Ny iray amin'ireo anton-javatra manan-danja indrindra mamaritra ny fahombiazan'ny fanasarahana sy ny fisarahana amin'ny alalan'ny centrifugation dia ny haben'ny poti sy ny hakitroky. Ny centrifugation dia tena mandaitra amin'ny fanasarahana ireo poti izay manana fahasamihafana lehibe amin'ny hakitroky, toy ny organelles, macromolecules, na poti-sela. Na izany aza, rehefa mitovy hakitroky na refy ny poti na singa, dia lasa sarotra ny fanasarahana araka ny tokony ho izy. Mety tsy ho ampy ny hery centrifugal mba hahazoana fisarahana tanteraka, ka miteraka fifanindry eo amin'ny tarika na fanasarahana tsy feno.

2. Fiaraha-miangona:

Ny co-sedimentation dia manondro ny olan'ny singa na poti-javatra sasany miara-mipetraka mandritra ny centrifugation, ka mahatonga azy ireo ho sarotra ny manasaraka azy ireo tanteraka. Mitranga ity tranga ity rehefa somary kely ny fahasamihafan'ny hakitroky eo amin'ireo singa, ka mitarika fifindran'ny singa mandritra ny centrifugation. Mety ho olana manokana ny co-sedimentation rehefa miasa amin'ny fangaro sarotra, toy ny santionany biolojika na complexes macromolecular, izay sarotra ny manasaraka ireo singa manokana noho ny toetrany mitovy.

3. Fahalotoan'ny santionany:

Mandritra ny fampiasana "centrifugation", mety ho olana goavana ny fahalotoan'ny santionany. Zava-dehibe ny hahazoana antoka fa voakarakara tsara ny fepetra sy ny masontsivana ampiasaina amin'ny "centrifugation" mba hampihenana ny fahalotoan'ny "rotor", ny fantsona, na ny fantsona fanangonana. Mety hanelingelina ny fizotran'ny "fragmentation" ny loto, ka hiteraka fahalotoan'ny santionany. Tokony hojerena tsara ny fisafidianana fitaovana "rotor" mety, ny fampiasana fantsona "centrifugation" mety, ary ny fampiharana ny fomba fanadiovana mahomby mba hisorohana ny fahalotoan'ny santionany.

4. Famahanana voafetra:

Ny famahana ny fizarazarana sy ny fisarahana amin'ny alalan'ny centrifugation dia miankina voalohany indrindra amin'ny safidin'ny centrifuge sy ny rotor. Ny teknika centrifugation samihafa, toy ny centrifugation differential na ny centrifugation density gradient, dia manolotra ambaratonga samihafa amin'ny famahana. Na dia manome fisarahana avo lenta aza ny centrifugation density gradient, dia mitaky dingana fanampiny sy fitaovana manokana izany. Ny centrifugation differential, na dia tsotra kokoa aza, dia mety manana famahana voafetra, ka mitarika ho amin'ny fifanindriana amin'ny tarika vokarina. Mila mandinika tsara ny famahana irina ho an'ny fampiharana manokana azy ireo ny mpikaroka ary misafidy ny fomba centrifugation mety araka izany.

5. Fotoana sy vola lany:

Mety handany fotoana sy handany vola be ny fanaovana "centrifugation". Ny fahazoana ny fanasarahana sy ny fizarana tsara indrindra dia mety mitaky dingana maromaro, fotoana fanasarahana lava kokoa, ary teknika manokana. Ohatra, mba hahazoana ampahany voadio tsara, dia mety mila manao dingana fanasarahana mifanesy ireo mpikaroka, ka miteraka fampiasam-bola amin'ny fotoana sy loharanon-karena bebe kokoa. Fanampin'izany, ny rotors sy centrifuges manokana afaka manasarahana haingana sy avo lenta dia mety ho lafo vidy ny fahazoana sy ny fikojakojana azy, ka mahatonga azy ho zava-dehibe ny fandanjana ny tombony amin'ny vidiny mifandraika amin'izany.

Fehin-kevitra:

Nanova tanteraka ny sehatry ny fanasarahana sy ny fisarahana ny "centrifugation", ka nahafahan'ny mpikaroka nahazo singa voadio avy amin'ny fangaro sarotra. Na izany aza, manana ny fetrany ihany koa izy io. Ny fifandimbiasan'ny "bands", ny fiaraha-miempo, ny fahalotoan'ny santionany, ny vahaolana voafetra, ary ny fotoana sy ny vidiny mifandraika amin'izany dia samy mametraka fanamby amin'ny fampiharana mahomby ny "centrifugation". Na eo aza ireo fetrany ireo, dia mbola teknika sarobidy amin'ny sehatra siantifika maro ny "centrifugation", ary ny fandrosoana mitohy dia mikendry ny handresy ireo fanamby ireo sy hanatsara ny fahombiazany. Tsy maintsy mandinika tsara ireo fetrany ireo mpikaroka ary manatsara ny protocole "centrifugation"-ny mba hahazoana antoka fa mahomby ny fanasarahana sy ny fanasarahana ho an'ny fampiharana manokana azy ireo.