чӣ гуна ҷудо кардани лизосомаҳо центрифугакунии пероксисомаҳоро ташкил медиҳанд

2023/08/17

Муқаддима ба лизосомаҳо ва пероксисомаҳо


Лизосомаҳо ва пероксисомаҳо ду органеллҳои алоҳидаи ҳуҷайра мебошанд, ки вазифаҳои гуногун доранд, ки дар мубодилаи ҳуҷайра ва гомеостаз нақши муҳим доранд. Лизосомаҳо органеллҳои ба мембрана басташуда мебошанд, ки аз ферментҳои ҳозима пур карда мешаванд, ки барои шикастани партовҳои ҳуҷайра, зарраҳои хориҷӣ ва патогенҳо масъуланд. Аз тарафи дигар, пероксисомаҳо дар реаксияҳои гуногуни метаболикӣ, махсусан реаксияҳои марбут ба детоксикация ва мубодилаи липидҳо иштирок мекунанд. Барои омӯзиши ин органеллҳо, як усули маъмулан истифодашаванда центрифуга мебошад. Дар ин мақола, мо мефаҳмем, ки чӣ гуна центрифугаро барои бомуваффақият ҷудо кардани лизосомаҳо аз пероксисомаҳо истифода бурдан мумкин аст.


Принсипҳо ва усулҳои центрифугакунӣ


Центрифуга як усули пурқувватест, ки барои ҷудо кардани ҷузъҳои гуногуни омехтаи гетерогенӣ аз рӯи ҳаҷм, зичӣ ва шакли онҳо истифода мешавад. Вай аз руи принципхои седиментация кор мекунад, ки дар он чо заррахои вазнинтар зери таъсири кувваи марказгурез тезтар чойгир мешаванд. Барои ҷудо кардани лизосомаҳоро аз пероксисомаҳо метавон усулҳои гуногуни центрифуга, ба монанди центрифугаи дифференсиалӣ ва центрифугаи градиентии зичро истифода бурдан мумкин аст.


Центрифугасияи дифференсиалӣ: истихроҷи лизосомаҳо ва пероксисомаҳо


Сентрифугасияи дифференсиалӣ як қатор қадамҳои центрифугаро бо суръат ва давомнокии гуногун барои ҷудо кардани органеллҳо вобаста ба зичии онҳо дар бар мегирад. Ин аст, ки чӣ тавр онро барои истихроҷи лизосомаҳо ва пероксисомаҳо истифода бурдан мумкин аст:


Қадами 1: Ҳомогенизатсия

Қадами аввал ин нарм кардани ҳуҷайраҳо ва озод кардани мундариҷаи онҳо бо истифода аз усули гомогенизатсия мебошад. Инро тавассути sonicating ё истифодаи як гомогенизатори махсус ба даст овардан мумкин аст. Омехтаи ҳосилшуда ҳамчун гомогенат номида мешавад.


Қадами 2: Центрифуга бо суръати паст

Сипас гомогенат ба центрифугаси пастсуръат (тақрибан 1,000-2,000 х г) барои як муддати кӯтоҳ гузаронида мешавад. Ин қадам барои ҷудо кардани партовҳои калонтари ҳуҷайра ва фраксияи ядроӣ аз боқимондаи органеллҳои дар гомогенат мавҷудбуда кӯмак мекунад.


Қадами 3: Центрифугатсия бо суръати миёна

Дар супернатанте, ки аз қадами центрифугаси пастсуръат ба даст оварда шудааст, ба центрифугаи миёнасуръат (тақрибан 10,000 x г) барои таҳшин кардани органеллҳои вазнин ба монанди лизосомаҳо ва пероксисомаҳо дучор мешавад. Ин қадам ба пелете оварда мерасонад, ки ин органеллҳоро дар бар мегирад.


Қадами 4: Шустан ва боздоред

Пелле, ки дар қадами қаблӣ гирифта шудааст, бо маҳлули буферии мувофиқ шуста мешавад ва сипас барои ба даст овардани фраксияи тозашудаи лизосома ва пероксисома дубора боз карда мешавад.


Центрифугатсияи градиенти зичии: тозакунии ҷудокунӣ


Сентрифугатсияи градиентии зичӣ як усули пешрафтаи центрифугакунӣ мебошад, ки имкон медиҳад минбаъд тоза ва такмил додани лизосомаҳо ва пероксисомаҳоро таъмин кунад. Дар ин усул, градиенти зичӣ бо истифода аз маҳлули градиентсоз ба монанди сахароза ё йодиксанол ташкил карда мешавад. Ин аст, ки чӣ тавр онро татбиқ кардан мумкин аст:


Қадами 1: Омода кардани градиенти зичии

Муҳити градиентии зичӣ, ба монанди сахароза, дар найчаи центрифуга бо зичии гуногун аз боло то поён ё аз поён ба боло омода карда мешавад. Таркиб ва зичии муҳити градиентӣ бодиққат интихоб карда мешавад, ки он нисбат ба пероксисомаҳо сабуктар, аммо нисбат ба лизосомаҳо зичтар аст.


Қадами 2: Қабати намуна

Фраксияи дубора боздошташудаи лизосома ва пероксисома, ки аз центрифугакунии дифференсиалӣ ба даст оварда шудааст, бодиққат дар болои муҳити градиенти зич ҷойгир карда мешавад.


Қадами 3: Центрифуга

Пас аз он найча ба центрифугаи баландсуръат (ультрацентрифугасия) гузаронида мешавад, то лизосомаҳо ва пероксисомаҳоро аз рӯи зичии шинокунандаи онҳо ҷудо кунанд. Ҳангоми центрифугакунӣ, органеллҳо тавассути муҳити атроф ҳаракат мекунанд, то он даме, ки онҳо ба минтақае расиданд, ки зичии онҳо ба зичии муҳити атроф мувофиқат мекунад ва бандҳои гуногунро ташкил медиҳанд.


Таҳлил ва барномаҳои минбаъда


Пас аз ҷудошавии бомуваффақият, фраксияҳои лизосома ва пероксисомаи ба даст овардашударо бо истифода аз усулҳои гуногун барои арзёбии тозагӣ, андоза, таркиб ва хосиятҳои функсионалии онҳо таҳлил кардан мумкин аст. Усулҳо, аз қабили микроскопияи электронӣ, иммуноцитохимия ва таҳлили фаъолияти ферментҳо метавонанд дар бораи фраксияҳои ҷудошуда тасаввуроти арзишманд дода, шахсият ва покии онҳоро тасдиқ кунанд.


Ғайр аз ҳадафҳои тадқиқотӣ, қобилияти ҷудо кардани лизосомаҳо ва пероксисомаҳо тавассути центрифугакунӣ дар ташхиси тиббӣ, таҳияи маводи мухаддир ва мудохилаҳои терапевтӣ татбиқ мешавад. Бо дарки беҳтари вазифаҳои ин органеллҳо, олимон метавонанд стратегияҳои нави терапевтиро, ки ба ихтилоли лизосомалӣ ё пероксисомалӣ, ба монанди бемориҳои лизосомалии нигоҳдорӣ ё ихтилоли биогенези пероксисома нигаронида шудаанд, кашф кунанд.


Хулоса, ҷудокунии лизосомаҳо аз пероксисомаҳо бо истифода аз усулҳои сентрифугасия, ба монанди центрифугаи дифференсиалӣ ва градиенти градиентӣ, як равиши муҳим дар таҳқиқоти биологияи ҳуҷайра мебошад. Ин усулҳо ба олимон имкон медиҳанд, ки фраксияҳои тозашудаи лизосомаҳо ва пероксисомаҳоро ба даст оранд ва дар фаҳмидани нақшҳои инфиродии онҳо, роҳҳои мубодилаи моддаҳо ва мудохилаҳои эҳтимолии терапевтӣ барои бемориҳои алоқаманд кӯмак кунанд.

.

БО МО ТАМОС ГИРЕД
Танҳо талаботи худро ба мо бигӯед, мо метавонем аз он чизе, ки шумо тасаввур карда метавонед, бештар кор карда метавонем.
Тафтиши худро фиристед
Chat
Now

Тафтиши худро фиристед

Забони дигареро интихоб кунед
English
Afrikaans
አማርኛ
العربية
Azərbaycan
Беларуская
български
বাংলা
Bosanski
Català
Sugbuanon
Corsu
čeština
Cymraeg
dansk
Deutsch
Ελληνικά
Esperanto
Español
Eesti
Euskara
فارسی
Suomi
français
Frysk
Gaeilgenah
Gàidhlig
Galego
ગુજરાતી
Hausa
Ōlelo Hawaiʻi
हिन्दी
Hmong
Hrvatski
Kreyòl ayisyen
Magyar
հայերեն
bahasa Indonesia
Igbo
Íslenska
italiano
עִברִית
日本語
Basa Jawa
ქართველი
Қазақ Тілі
ខ្មែរ
ಕನ್ನಡ
한국어
Kurdî (Kurmancî)
Кыргызча
Latin
Lëtzebuergesch
ລາວ
lietuvių
latviešu valoda‎
Malagasy
Maori
Македонски
മലയാളം
Монгол
मराठी
Bahasa Melayu
Maltese
ဗမာ
नेपाली
Nederlands
norsk
Chicheŵa
ਪੰਜਾਬੀ
Polski
پښتو
Português
Română
русский
سنڌي
සිංහල
Slovenčina
Slovenščina
Faasamoa
Shona
Af Soomaali
Shqip
Српски
Sesotho
Sundanese
svenska
Kiswahili
தமிழ்
తెలుగు
Точики
ภาษาไทย
Pilipino
Türkçe
Українська
اردو
O'zbek
Tiếng Việt
Xhosa
יידיש
èdè Yorùbá
简体中文
繁體中文
Zulu
Забони ҷорӣ:Точики