mar a sgaradh lysosomes a chruthachadh peroxisomes centrifugation

2023/08/17

Ro-ràdh do Lysosomes agus Peroxisomes


Tha lysosomes agus peroxisomes nan dà organelles cealla fa leth le gnìomhan sònraichte aig a bheil prìomh dhleastanasan ann am metabolism cealla agus homeostasis. Tha lysosomes nan organelles ceangailte ri membran air an lìonadh le enzyman cnàmhaidh le uallach airson a bhith a’ briseadh sìos stuthan sgudail cealla, mìrean cèin, agus pathogens. Tha peroxisomes, air an làimh eile, an sàs ann an diofar ath-bhualaidhean metabollach, gu sònraichte an fheadhainn co-cheangailte ri detoxification agus metabolism lipid. Gus sgrùdadh a dhèanamh air na h-organelles sin air leth, is e aon dhòigh air a chleachdadh gu cumanta centrifugation. San artaigil seo, nì sinn sgrùdadh air mar as urrainnear centrifugation a chleachdadh gus lysosomes a sgaradh bho peroxisomes gu soirbheachail.


Prionnsabalan agus dòighean-obrach centrifugation


Is e dòigh chumhachdach a th’ ann an centrifugation a thathas a’ cleachdadh gus diofar phàirtean de mheasgachadh heterogeneous a sgaradh a rèir am meud, dùmhlachd agus cumadh. Bidh e ag obair air prionnsapalan grùid, far am bi gràineanan nas truime a’ socrachadh nas luaithe fo bhuaidh feachd ceud-ghluasadach. Gus lysosomes a sgaradh bho peroxisomes, faodar diofar dhòighean centrifugation a chleachdadh, leithid centrifugation diofraichte agus centrifugation caisead dùmhlachd.


Centrifugation diofraichte: toirt a-mach lysosomes agus peroxisomes


Tha centrifugation eadar-dhealaichte a’ toirt a-steach sreath de cheumannan centrifugation aig diofar astaran agus amannan gus organelles a sgaradh a rèir an dùmhlachd. Seo mar a ghabhas a chleachdadh airson lysosomes agus peroxisomes a thoirt a-mach:


Ceum 1: Homogenization

Is e a’ chiad cheum na ceallan a bhriseadh gu socair agus an susbaint a leigeil ma sgaoil a ’cleachdadh dòigh homogenization. Faodar seo a choileanadh le sonicating no a 'cleachdadh speisealta homogenizer. Canar homogenate ris a’ mheasgachadh a thig às.


Ceum 2: Centrifugation aig astar ìosal

Tha an homogenate an uairsin fo ùmhlachd centrifugation aig astar ìosal (timcheall air 1,000-2,000 x g) airson ùine ghoirid. Bidh an ceum seo a’ cuideachadh le bhith a’ sgaradh sprùilleach cealla nas motha agus am bloigh niùclasach bhon chòrr de na h-organelles a tha an làthair anns an homogenate.


Ceum 3: Centrifugation aig astar meadhanach

Tha an supernatant a gheibhear bhon cheum centrifugation aig astar ìosal fo ùmhlachd centrifugation aig astar meadhanach (timcheall air 10,000 x g) gu organelles trom grùid leithid lysosomes agus peroxisomes. Mar thoradh air a’ cheum seo bidh peilear anns a bheil na h-organelles sin.


Ceum 4: Nigh agus ath-chuiridh

Tha am pellet a gheibhear sa cheum roimhe air a nighe le fuasgladh bufair iomchaidh agus an uairsin ath-chuiridh gus bloigh lysosome agus peroxisome ghlan fhaighinn.


Centrifugation caisead dùmhlachd: ag ùrachadh an dealachaidh


Tha centrifugation caisead dùmhlachd na dhòigh adhartach centrifugation a leigeas le tuilleadh glanadh agus ùrachadh air lysosomes agus peroxisomes. Anns an dòigh seo, tha caisead dùmhlachd air a chruthachadh le bhith a’ cleachdadh fuasgladh cruth caisead leithid sucrose no iodixanol. Seo mar a ghabhas a chuir an sàs:


Ceum 1: Ag ullachadh caisead dùmhlachd

Tha meadhan caisead dùmhlachd, leithid sucrose, air ullachadh ann an tiùb centrifuge, le dùmhlachd eadar-dhealaichte bho mhullach gu bonn no bonn gu mullach. Tha co-dhèanamh agus dùmhlachd a’ mheadhan caisead air an taghadh gu faiceallach, a’ dèanamh cinnteach gu bheil e nas aotroime na peroxisomes ach nas dùmhail na lysosomes.


Ceum 2: Layering of Sample

Tha am bloigh lysosome agus peroxisome ath-leasaichte a gheibhear bho centrifugation diofraichte air a chòmhdach gu faiceallach a bharrachd air meadhan caisead dùmhlachd.


Ceum 3: Centrifugation

Bidh an tiùb an uairsin fo smachd centrifugation aig astar àrd (ultracentrifugation) gus lysosomes agus peroxisomes a sgaradh stèidhichte air an dùmhlachd làidir. Rè centrifugation, bidh na h-organelles a 'gluasad tron ​​​​mheadhan gus an ruig iad sgìre far a bheil an dùmhlachd beothail aca a' freagairt ri dùmhlachd a 'mheadhan mun cuairt, a' cruthachadh bannan sònraichte.


Mion-sgrùdadh agus Iarrtasan a bharrachd


Às deidh dealachadh soirbheachail, faodar na bloighean lysosome agus peroxisome a gheibhear a sgrùdadh tuilleadh le bhith a’ cleachdadh diofar dhòighean gus an purrachd, am meud, an sgrìobhadh agus na feartan gnìomh a mheasadh. Faodaidh dòighean leithid microscopy dealanach, immunocytochemistry, agus measaidhean gnìomhachd enzyme seallaidhean luachmhor a thoirt seachad air na bloighean iomallach, a’ dearbhadh an dearbh-aithne agus an purrachd.


A bharrachd air adhbharan rannsachaidh, tha an comas air lysosomes agus peroxisomes a sgaradh tro centrifugation air a chleachdadh ann an breithneachadh meidigeach, leasachadh dhrogaichean, agus eadar-theachdan leigheasach. Le bhith a’ tuigsinn nas fheàrr gnìomhan nan organelles sin, faodaidh luchd-saidheans sgrùdadh a dhèanamh air ro-innleachdan teirpeach ùra a tha ag amas air eas-òrdughan lysosomal no peroxisomal, leithid galairean stòraidh lysosomal no eas-òrdughan biogenesis peroxisome.


Ann an co-dhùnadh, tha dealachadh lysosomes bho peroxisomes a’ cleachdadh dòighean centrifugation, leithid centrifugation diofraichte agus centrifugation caisead dùmhlachd, na dhòigh-obrach riatanach ann an rannsachadh bith-eòlas cealla. Tha na dòighean sin a’ toirt comas do luchd-saidheans bloighean fìor-ghlan de lysosomes agus peroxisomes fhaighinn, a’ cuideachadh le bhith a’ tuigsinn an dreuchdan fa-leth, slighean metabollach, agus eadar-theachdan teirpeach a dh’fhaodadh a bhith ann airson galairean co-cheangailte.

.

CUIR FIOS THUGAINN
Dìreach innis dhuinn na riatanasan agad, is urrainn dhuinn barrachd a dhèanamh na as urrainn dhut smaoineachadh.
Cuir an rannsachadh agad
Chat
Now

Cuir an rannsachadh agad

Tagh cànan eadar-dhealaichte
English
Afrikaans
አማርኛ
العربية
Azərbaycan
Беларуская
български
বাংলা
Bosanski
Català
Sugbuanon
Corsu
čeština
Cymraeg
dansk
Deutsch
Ελληνικά
Esperanto
Español
Eesti
Euskara
فارسی
Suomi
français
Frysk
Gaeilgenah
Gàidhlig
Galego
ગુજરાતી
Hausa
Ōlelo Hawaiʻi
हिन्दी
Hmong
Hrvatski
Kreyòl ayisyen
Magyar
հայերեն
bahasa Indonesia
Igbo
Íslenska
italiano
עִברִית
日本語
Basa Jawa
ქართველი
Қазақ Тілі
ខ្មែរ
ಕನ್ನಡ
한국어
Kurdî (Kurmancî)
Кыргызча
Latin
Lëtzebuergesch
ລາວ
lietuvių
latviešu valoda‎
Malagasy
Maori
Македонски
മലയാളം
Монгол
मराठी
Bahasa Melayu
Maltese
ဗမာ
नेपाली
Nederlands
norsk
Chicheŵa
ਪੰਜਾਬੀ
Polski
پښتو
Português
Română
русский
سنڌي
සිංහල
Slovenčina
Slovenščina
Faasamoa
Shona
Af Soomaali
Shqip
Српски
Sesotho
Sundanese
svenska
Kiswahili
தமிழ்
తెలుగు
Точики
ภาษาไทย
Pilipino
Türkçe
Українська
اردو
O'zbek
Tiếng Việt
Xhosa
יידיש
èdè Yorùbá
简体中文
繁體中文
Zulu
Cànan gnàthach:Gàidhlig