Tha an tairgse againn de Allweyes AI a’ bòstadh smachd AI le èifeachdas iongantach.
Cànan
Tha an tairgse againn de Allweyes AI a’ bòstadh smachd AI le èifeachdas iongantach.
A bheil centrifuge a 'sgaradh DNA bho phròtainean?
Ro-ràdh
Tha centrifugation na dhòigh deatamach air a chleachdadh gu farsaing ann an rannsachadh saidheansail agus deuchainn-lannan clionaigeach airson diofar phàirtean de shampall a sgaradh a rèir an dùmhlachd. Tha aon chleachdadh cumanta den dòigh seo a’ toirt a-steach a bhith a’ dealachadh DNA agus pròtanan bho shampall bith-eòlasach sònraichte. San artaigil seo, nì sinn sgrùdadh a bheil centrifuge comasach air DNA a sgaradh gu h-èifeachdach bho phròtainean agus sgrùdadh a dhèanamh air na diofar dhòighean-obrach a thathas a’ cleachdadh gus dealachadh èifeachdach a choileanadh.
Tuigsinn Centrifugation
Mus tèid thu a-steach do na mion-fhiosrachadh mu bhith a ’sgaradh DNA bho phròtainean a’ cleachdadh centrifuge, tha e cudromach tuigsinn prionnsapalan bunaiteach centrifugation. Bidh centrifuge ag obair air prionnsapal grùid agus a’ cleachdadh snìomh aig astar àrd gus feachd ceud-ghluasadach làidir a chruthachadh. Bidh an fheachd seo ag adhbhrachadh mìrean ann an sampall dealachadh a rèir an dùmhlachd, le mìrean nas dùmhail a’ gluasad gu bonn an t-sampall tube. Mar thoradh air an sin, tha mìrean nas aotroime buailteach fuireach aig a’ mhullach.
An dùbhlan mu bhith a’ sgaradh DNA agus proteinichean
Nuair a thig e gu bhith a’ sgaradh DNA agus pròtanan, tha e na dhùbhlan leis gu bheil cuideaman moileciuil coltach ris an dà mholacile. Às aonais dòigh sgaraidh èifeachdach, tha e duilich sampallan DNA no pròtain fìor-ghlan fhaighinn. Ach, faodaidh centrifugation cuideachadh leis a’ phròiseas dealachaidh, ach is dòcha nach bi e gu leòr leis fhèin.
1. Differential Centrifugation: Tòiseachadh dealachadh
2. Ultracentrifugation: Leasaichte dealachadh
3. Density caisead Centrifugation: Ag ùrachadh a 'phròiseas
4. Cudromachd Taghadh Bufair
5. Centrifugation an aghaidh dòighean eile dealachaidh
Centrifugation diofraichte: dealachadh tùsail
Is e centrifugation eadar-dhealaichte a’ chiad cheum ann a bhith a’ sgaradh DNA bho phròtainean. Bidh an dòigh seo a’ cleachdadh diofar astaran centrifugation gus dealachadh farsaing de cho-phàirtean cealla a choileanadh. Rè a ’mhodh-obrachaidh seo, bidh ceallan homogenized no sampallan clò fo smachd centrifugation aig astar ìosal, mar as trice timcheall air 1000-5000 tionndadh gach mionaid (rpm). Tha an snìomh aig astar ìosal seo a’ comasachadh nuclei agus ceallan iomlan a sgaradh, a’ leantainn gu bloigh bheag. Ach, chan eil e a’ toirt seachad sgaradh iomlan de DNA agus pròtainean.
Ultracentrifugation: dealachadh nas fheàrr
Gus faighinn thairis air crìochan centrifugation eadar-dhealaichte, thig ultracentrifugation a-steach don t-sealladh. Is e centrifuges àrd-astar a th’ ann an Ultracentrifuges a tha comasach air astaran suas ri 100,000 rpm a ruighinn. Le bhith a’ cur a’ bhloigh amh a gheibhear bhon chiad centrifugation aig astar ìosal gu ultracentrifugation, faodar ìre nas àirde de sgaradh eadar DNA agus pròtanan a choileanadh. Bidh na moileciuilean DNA trom a’ grùid gu bonn an tiùba, a’ cruthachadh pellet faicsinneach, fhad ‘s a tha pròtanan a’ fuireach anns an supernatant.
Centrifugation caisead dùmhlachd: ag ùrachadh a’ phròiseis
Gus tuilleadh leasachaidh a dhèanamh air dealachadh DNA agus pròtanan, thathas a’ cleachdadh centrifugation caisead dùmhlachd. Anns an dòigh seo, thathar ag ullachadh meadhan caisead dùmhlachd, leithid sucrose no cesium chloride. Tha am meadhan seo air a dhèanamh suas de raon de dhlùths, ag àrdachadh bho mhullach gu bonn an tiùba centrifuge. Tha am bloigh amh a gheibhear bhon cheum roimhe seo air a chòmhdach gu faiceallach a bharrachd air an caisead dùmhlachd agus fo smachd ultracentrifugation a-rithist. Bidh an DNA agus pròtanan a’ sgaradh a rèir an dùmhlachd agus a’ cruthachadh bannan sònraichte taobh a-staigh an caisead. Tha bloigh an caisead a’ leigeil le sampallan DNA fìor-ghlan agus pròtain fhaighinn air ais.
Cudromachd Taghadh Bufair
Tha pàirt deatamach aig a’ bhufair a thathar a’ cleachdadh aig àm ceud-ghluasadach ann a bhith a’ coileanadh dealachadh èifeachdach. Bidh e a’ toirt buaidh air seasmhachd agus ionracas nam moileciuilean a thathas a’ sgaradh. Airson DNA, tha bufair Tris-EDTA le pH de 8.0 air a chleachdadh gu cumanta air sgàth a chomas seasmhachd DNA a chumail suas. Air an làimh eile, feumaidh pròtanan bufairean le ìrean pH sònraichte, mar as trice timcheall air 7.0, gus casg a chuir air dì-nàdurachadh agus an structar dùthchasach aca a chumail suas. Bidh taghadh am bufair iomchaidh a’ dèanamh cinnteach gu bheil DNA agus pròtanan air an sgaradh gu ceart gun a bhith a’ toirt buaidh air an càileachd.
Centrifugation an aghaidh dòighean dealachaidh eile
Ged a tha centrifugation na dhòigh air a chleachdadh gu farsaing ann a bhith a’ sgaradh DNA bho phròtainean, tha e cudromach aideachadh gur dòcha nach e seo an aon dòigh a thathas a’ cleachdadh. Faodaidh dòighean eile, leithid cromatagrafaidheachd, electrophoresis, agus sileadh, cur ri centrifugation gus dealachadh nas mionaidiche a choileanadh. Tha na buannachdan agus na crìochan aige fhèin aig gach innleachd, agus bidh luchd-rannsachaidh gu tric a’ cothlamadh grunn dhòighean gus an purrachd a tha a dhìth fhaighinn agus faighinn air ais DNA agus pròtanan.
Co-dhùnadh
Gu crìch, ged a tha centrifuge gu dearbh feumail airson DNA a sgaradh bho phròtainean, bidh e ag obair as fheàrr ann an co-bhonn ri dòighean eile. Bidh centrifugation diofraichte, ultracentrifugation, agus centrifugation caisead dùmhlachd a’ cruthachadh sreath de cheumannan dealachaidh a chuidicheas le bhith a’ faighinn sampaill nas glaine. A bharrachd air an sin, le bhith a’ taghadh bufairean iomchaidh agus a’ beachdachadh air dòighean dealachaidh eile a’ cur ri èifeachdas iomlan dealachadh pròtain DNA.
.