ሴንትሪፉግሽን፡ ክሎሮፕላስት እና ሚቶኮንድሪያን የመለየት ኃይለኛ ቴክኒክ
መግቢያ፡-
ሴንትሪፉግሽን በሞለኪውላር ባዮሎጂ እና ባዮኬሚስትሪ በስፋት ጥቅም ላይ የዋለ ቴክኒክ ሲሆን ይህም የተለያዩ ሴሉላር ክፍሎችን በመጠን፣ ቅርፅ እና መጠጋጋት መለየት ያስችላል። ይህ ጽሑፍ ክሎሮፕላስትን እና ሚቶኮንድሪያን ለመለየት ሴንትሪፍግሽን አተገባበርን በጥልቀት ያብራራል ፣ በ eukaryotic cells ውስጥ በሃይል ምርት እና በሌሎች አስፈላጊ ሴሉላር ሂደቶች ውስጥ የሚገኙትን ሁለት አስፈላጊ የአካል ክፍሎች።
በሴሉላር ሂደቶች ውስጥ የክሎሮፕላስትስ እና ሚቶኮንድሪያ ሚና
በእጽዋት ሴሎች ውስጥ የሚገኙት ክሎሮፕላስትስ ለፎቶሲንተሲስ ተጠያቂ ናቸው, ይህ ሂደት የብርሃን ኃይልን ወደ ኬሚካላዊ ኃይል በግሉኮስ መልክ የተከማቸ ነው. ይህ አስፈላጊ ሂደት ኦክስጅንን ለማምረት ያመቻቻል እና በምድር ላይ ላለው ህይወት መኖነት መሰረታዊ ነው። በዕፅዋትም ሆነ በእንስሳት ሴሎች ውስጥ የሚገኘው ሚቶኮንድሪያ በተለምዶ የሕዋስ ኃይል ተብሎ ይጠራል። በአዴኖሲን ትሪፎስፌት (ኤቲፒ) መልክ ግሉኮስን ወደ ሴል ጥቅም ላይ የሚውል ሃይል በመቀየር ለሴሉላር መተንፈሻ ሃላፊነት አለባቸው።
ክሎሮፕላስትስ እና ሚቶኮንድሪያን የመለየት አስፈላጊነት
ስለ ሴሉላር ሂደቶች ግንዛቤን ለማግኘት እና ለተለያዩ በሽታዎች ህክምናዎችን ለማዳበር ለሚፈልጉ ተመራማሪዎች የክሎሮፕላስት እና ሚቶኮንድሪያን ግለሰባዊ ተግባራት እና ባህሪያት መረዳት በጣም አስፈላጊ ነው። ለበለጠ ትንተና እና ለሙከራ ንጹህ ናሙናዎችን ለማግኘት እነዚህን የአካል ክፍሎች ከተወሳሰቡ የሴሉላር ክፍሎች መለየት ወሳኝ ነው። ይህ መለያየት በሴንትሪፍግሽን ይቻላል.
ሴንትሪፍጌሽን መሰረታዊ ነገሮች
ሴንትሪፉጋል በናሙና ውስጥ ክፍሎችን ለመለየት ሴንትሪፉጋል ኃይልን መጠቀምን ያካትታል። ናሙናው በከፍተኛ ፍጥነት የሚሽከረከር ሮተር ያለው ማሽን በሴንትሪፉጅ ውስጥ ተቀምጧል። በሚሽከረከርበት ጊዜ የሴንትሪፉጋል ሃይል ጥቅጥቅ ያሉ አካላት ከታች ወደ ደለል እንዲፈስሱ ያደርጋል, ፔሌት ይፈጥራል, ትንሽ ጥቅጥቅ ያሉ ክፍሎች ደግሞ በሱፐርናይት ውስጥ ይቀራሉ. የሴንትሪፉጅሽን ፍጥነት እና የቆይታ ጊዜ, እንዲሁም የሴንትሪፉጅ ቱቦዎች ምርጫ, እንደ ልዩ መተግበሪያ እና ናሙና ቅንብር ይለያያል.
ለኦርጋኔል መለያየት ልዩነት ሴንትሪፍጌሽን
ለኦርጋኔል መለያየት በብዛት ጥቅም ላይ የሚውለው የሴንትሪፍግሽን ዘዴ ልዩነት ነው. ይህ ዘዴ የናሙናውን ክፍልፋይ በመከፋፈል መርህ ላይ የተመሰረተ ሲሆን ይህም በተከታታይ ፍጥነቶች እና የቆይታ ጊዜዎች ላይ ወደተለያዩ ልዩ ልዩ ሴንትሪፍግሽኖች በማስገዛት ነው። የሴንትሪፍጅን መለኪያዎችን በማስተካከል, ተመራማሪዎች ክሎሮፕላስት እና ሚቶኮንድሪያን ከሌሎች ሴሉላር ክፍሎች በትክክል መለየት ይችላሉ.
ክሎሮፕላስትስ እና ሚቶኮንድሪያን ለመለየት የደረጃ በደረጃ መመሪያ
ደረጃ 1: ግብረ-ሰዶማዊነት
ልዩነት centrifugation ውስጥ የመጀመሪያው እርምጃ ናሙና ያለውን homogenization ነው. ይህ ሂደት ሴሎቹን ቀስ ብሎ መስበር እና ይዘታቸውን መልቀቅን ያካትታል ይህም ወደ ኦርጋኔል እንዲደርስ ያስችላል። እንደ ሜካኒካል መስተጓጎል እና ፈሳሽ ናይትሮጅን ሕክምናን የመሳሰሉ ለሴሎች መቆራረጥ ብዙ ዘዴዎችን መጠቀም ይቻላል.
ደረጃ 2፡ ልዩነት ሴንትሪፍግሽን
ተመሳሳይነት (homogenization) ከተከተለ በኋላ, ናሙናው በተከታታይ የተለያየ ሴንትሪፍግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግግላለች. የመጀመሪያው ዝቅተኛ-ፍጥነት ማዕከላዊ (1000-2000 x g) ትላልቅ ሴሉላር ፍርስራሾችን እና ያልተሰበሩ ህዋሶችን ያስወግዳል, ጥሬው ሚቶኮንድሪያ እና የክሎሮፕላስት ክፍልፋይ ይቀራል. ከዚያም ይህ ክፍልፋዩ ከፍተኛ ፍጥነት ያለው ሴንትሪፍግሽን (10,000-15,000 x g) እንዲፈጠር ይደረጋል, በዚህም ምክንያት ክሎሮፕላስትስ ከ mitochondria ይለያል.
ደረጃ 3፡ ንፅህናን ማሻሻል
የተገኘውን የክሎሮፕላስት እና የ mitochondria ክፍልፋዮችን የበለጠ ለማጣራት, ተጨማሪ የሴንትሪፍግሽን እርምጃዎችን ማከናወን ይቻላል. ይህ ከእያንዳንዱ ሴንትሪፍግግግ በኋላ የተገኘውን ፔሌት በተገቢው ቋት ውስጥ እንደገና ማቆየት እና ሂደቱን በበለጠ ፍጥነት እና ቆይታ መድገምን ያካትታል። እነዚህ ተጨማሪ ሴንትሪፍጅቶች ማንኛውንም ቀሪ ብክለትን ለማስወገድ እና የመጨረሻውን የኦርጋን ክፍልፋዮች ንፅህናን ለመጨመር ይረዳሉ.
ማጠቃለያ፡-
ሴንትሪፉግሽን የሕዋስ ባዮሎጂን መስክ አብዮት ያመጣ እና ሴሉላር ክፍሎችን ለመለየት አስፈላጊ መሣሪያ ሆኖ የተገኘ ሁለገብ ዘዴ ነው። ተመራማሪዎች ዲፈረንሻል ሴንትሪፍጋሽንን በመጠቀም ክሎሮፕላስት እና ሚቶኮንድሪያን በተሳካ ሁኔታ በመለየት ለተጨማሪ ትንተና እና ሙከራ ጠቃሚ የሆኑ የተጣራ ናሙናዎችን ያቀርባሉ። እነዚህን የአካል ክፍሎች የማግለል ችሎታ ልዩ ተግባሮቻቸውን እና ስልቶቻቸውን ለማጥናት በሮችን ይከፍታል ፣ ይህም ስለ ሴሉላር ሂደቶች የተሻለ ግንዛቤ እንዲኖር እና በተለያዩ የሳይንስ ዘርፎች ውስጥ እድገቶችን ለማስፋፋት አስተዋፅ contrib ያደርጋል።
.